T8802

Trypsin aus Rinderpankreas

TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein

• CAS-Nummer: 9002-07-7
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-650-8
• MDL number: MFCD00082094
• EG-Nummer: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥10,000 BAEE units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Eigenschaften

• biological source: bovine pancreas
• Quality Segment: 200
• sterility: aseptically filled
• form: essentially salt-free, lyophilized powder
• specific activity: ≥10,000 BAEE units/mg protein
• mol wt: 23.8 kDa
• composition: protein, ≥95%
• solubility: hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
• foreign activity: Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

The trypsin molecule has two domains: one is related to the enzyme active site and the tryptophan residues; the other is related to the 8-anilinonaphthalene-1-sulfonate binding.

Application

Für den Trypsinverdau von Peptiden ein Verhältnis von ca. 1:100 bis 1:20 (Trypsin:Peptid) verwenden. Die typische Verwendung für dieses Produkt besteht im Entfernen von adhärenten Zellen von einer Kulturoberfläche. Die zum Ablösen von Zellen von ihrem Substrat erforderliche Trypsinkonzentration hängt in erster Linie vom Zelltyp und dem Alter der Kultur ab. Trypsine werden auch für die Resuspendierung von Zellen während der Zellkultur, in der Proteomikforschung für den Verdau von Proteinen und in verschiedenen In-Gel-Verdaus verwendet. Weitere Anwendungsbereiche sind u. a. die Beurteilung der Kristallisierung mit membranbasierten Methoden und eine Studie zur Feststellung, ob Proteinfaltungsraten und Proteinausbeuten durch das Vorhandensein von sog. „kinetischen Fallen“ begrenzt werden können.

Trypsin can be used to release adherent cells from tissue culture plates for passaging. Trypsin has been used in a study to assess the effects of macromolecular crowding on the structural stability of human α-lactalbumin. Trypsin has also been used in a study to investigate BN-PAGE analysis of Trichoderma harzianum secretome.

Biochem/physiol Actions

Trypsin spaltet Peptide auf der C-terminalen Seite von Lysin- und Argininrückständen. Die Hydrolyse dieser Reaktion wird verlangsamt, wenn sich auf einer der Seiten der Spaltstelle ein Säurerest befindet, und die Hydrolyse wird beendet, wenn sich auf der Carboxylseite der Spaltstelle ein Prolinrest befindet. Der optimale pH-Wert für die Trypsinaktivität liegt zwischen 7 und 9. Trypsin kann auch zum Spalten von Ester und Amidbindungen von synthetischen Derivaten von Aminosäuren eingesetzt werden. EDTA wird Trypsinlösungen als Chelatbildner zugegeben, der Calcium- und Magnesiumionen neutralisiert, welche die Peptidbindungen verdecken, auf die sich das Trypsin auswirkt. Durch das Entfernen dieser Ionen wird die enzymatische Aktivität verstärkt.

Serinprotease-Inhibitoren, u. a. DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF und Aprotinin, hemmen Trypsin.

Preparation Note

TPCK treated

Analysis Note

Protein determined by E1%/280

Other Notes

Eine BAEE-Einheit erzeugt unter Verwendung von BAEE als Substrat ein A₂₅₃ von 0,001 pro Minute bei einem pH-Wert von 7,6 und einer Temperatur von 25 °C.

One BAEE unit will produce a ΔA₂₅₃ of 0.001 per min at pH 7.6 at 25 °C using BAEE as substrate. Reaction volume = 3.2 ml (1 cm light path).

View more information on trypsin at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Signalwort: Danger
• Gefahrencodes: H315,H319,H334,H335
• Sicherheitshinweise: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Zielorgane: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• Was ist los?: WGK 1
• PSA (Persönliche Schutzausrüstung): dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves