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DUO92101

Duolink® Kit iniciador rojo in situ ratón o conejo

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UNSPSC Code:
41116158
NACRES:
NA.32

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Duolink®

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proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

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DUO92008DUO92013DUO92007
Duolink® Kit iniciador rojo in situ ratón o conejo

Sigma-Aldrich

DUO92101

Duolink® Kit iniciador rojo in situ ratón o conejo

Reactivos rojos para detección in situ Duolink®

Sigma-Aldrich

DUO92008

Reactivos rojos para detección in situ Duolink®

Duolink® In Situ Detection Reagents FarRed

Sigma-Aldrich

DUO92013

Duolink® In Situ Detection Reagents FarRed

Duolink® In Situ Detection Reagents Orange

Sigma-Aldrich

DUO92007

Duolink® In Situ Detection Reagents Orange

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

suitability

suitable for fluorescence

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suitable for fluorescence

suitability

suitable for fluorescence

suitability

suitable for fluorescence

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)

fluorescence

λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50)

fluorescence

λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)

product line

Duolink®

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Duolink®

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Duolink®

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Duolink®

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Application

El ensayo de ligadura de proximidad (PLA®) Duolink® permite la detección endógena de interacciones proteicas, modificaciones postraduccionales y niveles de expresión de proteínas al nivel de molécula única en células y muestras de tejido fijas.

Siga el protocolo de fluorescencia in situ Duolink® para usar este producto También se dispone de un conjunto de instrucciones cortas.

Visite nuestro Centro de recursos de PLA Duolink® si desea información sobre cómo realizar un experimento Duolink®, las aplicaciones, la resolución de problemas y más.

Para realizar un experimento de PLA Duolink® in situ, necesitará dos anticuerpos primarios (validados para PLA, IHC, ICC o IF) que reconozcan dos epítopos específicos. Este kit iniciador suministra el resto de reactivos necesarios para 30 reacciones de PLA Duolink®, lo que incluye un par de sondas para PLA (anti-conejo PLUS y anti-ratón MINUS), reactivos de detección rojos, disoluciones tampón rojos y medio de montaje. Nótese que los anticuerpos primarios deben proceder de las mismas especies que las sondas para PLA Duolink®. El análisis se lleva a cabo utilizando un equipo de inmunofluorescencia estándar.

Especificidad
El kit iniciador rojo in situ Duolink® ratón/conejo requiere un anticuerpo primario de ratón y un anticuerpo primario de conejo. A menudo se utilizan reactivos de detección de fluorescencia roja con el filtro Texas Red®.

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios producidos en especies diferentes. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonal o policlonal) en inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) convencionales para determinar las condiciones de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos Duolink® PLA in situ son adecuados para su utilización de células fijadas, células de cytospin, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formalina, incluidas en parafina (FFPE) o tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Cliente para acelerar sus proyectos Duolink®.

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Especificidad
El kit iniciador rojo in situ Duolink® ratón/conejo requiere un anticuerpo primario de ratón y un anticuerpo primario de conejo. Los reactivos de detección de fluorescencia roja suelen utilizarse con el filtro Texas Red® .

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios inducidos en diferentes especie Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonales o policlonales) en una prueba convencional de inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) para determinar las condiciones óptimas de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos para PLA Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de citoespín, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formol o incluidas en parafina (FFPE) o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Ciente para acelerar sus proyectos DuoLink®

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El kit iniciador rojo in situ Duolink® se ha utilizado en los análisis de ligadura de proximidad.[1][2]

Features and Benefits

  • No se requiere sobreexpresión ni manipulación genética
  • Elevada especificidad (menos falsos positivos)
  • Sensibilidad de molécula única debido a amplificación por círculo rodante
  • Posible cuantificación relativa
  • No se precisa un equipo especial
  • Más rápida y sencilla que la FRET
  • Mayor precisión en comparación con la co-IP
  • Resultados listos para publicación

Other Notes

Ganador del premio CiteAb 2024 como proveedor de éxito en la investigación del Parkinson

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

Los componentes del kit también están disponibles por separado

Referencia del producto
Descripción
SDS
  • DUO92002Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)SDS
  • DUO92004Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)SDS
  • DUO92008Duolink® In Situ Detection Reagents RedSDS
  • DUO82049Duolink® In Situ Wash Buffers, FluorescenceSDS
  • DUO82040Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPISDS

signalword

Danger

Hazard Classifications

Aquatic Chronic 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Clase de almacenamiento

8A - Combustible corrosive hazardous materials

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Ramkumar P, et al.
The Journal of Biological Chemistry (2015)
Targeting CPT1A-mediated fatty acid oxidation sensitizes nasopharyngeal carcinoma to radiation therapy.
Tan Z, et al.
Theranostics, 8(9), 2329-2329 (2018)
New protein?protein interactions of mitochondrial connexin 43 in mouse heart.
Denuc A, et al.
Journal of Cellular and Molecular Medicine, 20(5), 794-803 (2016)
Ivan Duran et al.
Human molecular genetics, 24(7), 1918-1928 (2014-12-17)
Osteogenesis imperfecta (OI) is a genetic disorder that results in low bone mineral density and brittle bones. Most cases result from dominant mutations in the type I procollagen genes, but mutations in a growing number of genes have been identified
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
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Protocolos

Duolink® PLA Fluorescence Protocol

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

Duolink® In Situ Short Instructions - Fluorescence

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

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Interacciones de ácidos nucleicos y proteínas

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Questions

1–8 of 8 Questions  

  1. I want to use Duolink™ in Multiwell Plates: is the Duolink® In Situ Microplate Nuclear Stain, Anti-Fade included in the Duolink In Situ starter kit?

    1 answer

    1. Product: DUO92101 is our Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit.

      This kit contains the following components:

      Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) (DUO92002)
      Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L) (DUO92004)

      These components are each comprised of the following:
      • 5x PLA Probe Anti-Rabbit PLUS - Donkey anti-rabbit secondary antibody conjugated to oligonucleotide PLUS
      • 1x Blocking Solution - Reagent for blocking of the sample
      • 1x Antibody Diluent - For dilution of PLA probes and primary antibodies

      Duolink® In Situ Detection Reagents Red (DUO92008)

      This component is comprised of the following:
      • 5x Ligation - Contains oligonucleotides that hybridize to the PLA probes and all components needed for ligation except the Ligase
      • 1x Ligase (1 unit/?L)
      • 1x Polymerase (10 units/?L)
      • 5x Amplification Red - Contains all components needed for Rolling Circle Amplification (RCA) except the Polymerase. It also contains oligonucleotide probes labeled with a fluorophore that hybridize to the RCA product.

      Duolink® In Situ Wash Buffers, Fluorescence (DUO82049)
      Wash Buffer A is used after the PLA Probe incubation step and Wash Buffer B is used after incubation with the amplification reagents.

      Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPI (DUO82040)
      Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPI is ideal for nuclear staining and preserving signals generated with the Duolink® In Situ Detection Reagents for fluorescence microscopy. Note: Counterstaining with Cy®2 is not recommended.

      The Duolink® In Situ Microplate Nuclear Stain, Anti-Fade is sold separately.

      Helpful?

  2. Which fixation method (formalin, PFA, ethanol, aceton/methanol) do you recommend to use for fresh frozen tissue slides before applying the PLA?

    1 answer

    1. The choice of fixation techniques varies between sample types. Academic literature should be consulted to determine the proven methods of fixation for the specific frozen tissue types used in IHC and PLA experiments to best address this question.

      Helpful?

  3. Does this kit contain antibody diluent and blocking solution? Or do you have to buy them separately?

    1 answer

    1. The kit contains antibody 1X diluent and 1X blocking solution, which can be found in the component DUO92002 and DUO92004.

      Helpful?

  4. Hello, Is this kit also suitable for flow cytometry-based analysis of the data?

    1 answer

    1. This kit is NOT suitable for flow cytometry. Please see our Duolink® flowPLA Mouse/Rabbit Starter Kits for flow cytometry: DUO94102 (Green), DUO94104 (Far Red), & DUO94105 (Violet).

      Helpful?

  5. Can the Duolink kits be used with a Mouse IgM antibody?

    1 answer

    1. Duolink kits may be compatible with a Mouse IgM antibody, provided that the antibody contains the light chain. The Anti-Mouse MINUS probe specifically interacts with mouse IgG (H+L) and the light chains associated with IgM. Therefore, if the Mouse IgM antibody includes the light chain, it should be suitable for use with the Duolink kits.

      Helpful?

  6. How many reactions can be done with this kit?

    1 answer

    1. The Duolink™ starter kit contains all the components necessary to analyze up to 30 reactions in one single order. Please see the link below to review the full protocol:
      https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/protein-and-nucleic-acid-interactions/duolink-fluorescence-user-manual#DuolinkPLAFluorescenceProtocol

      Helpful?

  7. I want to study the interaction of two cell surface proteins using PLA kit . My primaries are mouse and rabbit. Does the kit have the two secondary and also all the components that i would require to carry out the assay. Can you advice?

    1 answer

    1. The Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit - DUO92101 contains the Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG, and Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L) secondary antibodies and everything needed to conduct the PLA assay.

      Helpful?

  8. What is the expiry date of the kit contents?

    1 answer

    1. This product is not assigned an expiration date or recommended retest date. Products with no expiration date or recommended retest date should be routinely inspected by customers to ensure they perform as expected. These products are also subject to a one-year warranty from the date of shipment.

      For more information, you may access the "Product Dating Information" document under "ADDITIONAL USEFUL DOCUMENTS ABOUT OUR PRODUCTS" at the bottom of the Quality Services page with this link: https://www.sigmaaldrich.com/life-science/quality-and-regulatory-management/quality-services.

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