MILLIPLEX® マルチプレックスアッセイ測定原理
マルチプレックスアッセイは、細胞又は生体由来の少量サンプル（～25μl）中のタンパク質を1 ウェルあたり最大500種類（FLEXMAP™ 3DシステムおよびxMAP® INTELLIFLEXシステムを使用した場合）まで同時に検出できるイムノアッセイシステムです。このシステムは、Luminex xMAP® テクノロジーを用いたマルチプレックス解析装置と、専用アッセイキット（MILLIPLEX® マルチプレックスアッセイキット）を共に使用することにより、ヒトおよび動物（サル、イヌ、ラット、マウス等）由来のサンプル（血清、血漿、細胞上清、組織等）中の疾患バイオマーカーやシグナルタンパク質を迅速かつ正確に測定します。
Luminex®最新機種「xMAP® INTELLIFLEX」
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Luminex Assayの原理（Luminex xMAP® テクノロジー）
2種類の蛍光色素で段階的に染色して、100種類のビーズを作製します（FLEXMAP™ 3DおよびxMAP® INTELLIFLEXは3種類の蛍光色素で500種類のビーズを作製）。 ビーズ固有値（ビーズ番号）の識別がLuminex xMAP® テクノロジーの基礎です。1種類のビーズには1種類の抗体を結合させます（図中例は、IL-9、TNFα、IFNγ）。
3種類の抗体の付いたビーズを1つのウェルに入れます。
サンプル液とビーズのインキュベーションにより測定ターゲット（タンパク質）がビーズ表面の抗体に結合します。
さらに、ビオチン標識抗体を結合させ、ストレプトアビジン-PE で蛍光ラベルします。
フローサイトメトリー技術を利用し、2種類のレーザーで標的タンパク質量とビーズ番号の測定を行います。
少量のサンプルで、最大500種類のタンパク質を同時測定
メルクのマルチプレックスアッセイシステムには、Luminex® 200™ システム、FLEXMAP™ 3Dシステム、xMAP® INTELLIFLEXシステムの3機種があります。マルチプレックスアッセイシステムは、従来のELISA法と比較して、労力、コスト、実験エラーを最小にし、少量サンプルから広いダイナミックレンジで最大500種類のタンパク質の同時測定が可能です。
各システムの詳細についてはLuminex®マルチプレックスプラットフォームの比較をご覧ください。
特長
- 少量サンプル中に存在する複数のタンパク質をMILLIPLEX® マルチプレックスアッセイキットで最大500種類まで同時測定。
- MILLIPLEX® マルチプレックスアッセイキットはヒトだけでなく疾患モデル動物（イヌ、サル、ラット、マウス等）用パネルも選択可能。
- Belysa® Immunoassay Curve Fittingソフトウェアは、測定データのカーブフィッティング、解析、比較が可能。
アッセイキットの詳細についてはMILLIPLEX® マルチプレックスアッセイキットの特長をご覧ください。
仕様
| Luminex®マルチプレックスプラットフォーム | ||||
|---|---|---|---|---|
| Luminex® 200™ | FLEXMAP 3D™ | xMAP® INTELLIFLEX RUO | xMAP® INTELLIFLEX DRSE | |
 |  |  | ||
| 測定原理 | フローサイトメトリー法 | |||
| 励起部 | ビーズ識別用： 635 nm | 638 nm | 638 nm | 638 nm |
| サンプル定量用： 532 nm | 532 nm | 532 nm（RP1） | 532 nm（RP1） 405 nm（RP2） | |
| 検出部 | ビーズ識別用： APD（温度補正型アバランシェフォトダイオード） | |||
| サンプル定量用： PMT （検出範囲 565～585 nm） | PMT （検出範囲 565～585 nm） | PMT RP1 （検出範囲 565～585 nm） | PMT RP1 （検出範囲 565～585 nm） PMT RP2 （検出範囲 421～441 nm） | |
| 対応ビーズ | 磁気ビーズ/ 非磁気ビーズ | |||
| 測定時間 | 約45 min/96 ウェル | 約20 min/96 ウェル 約75 min/384 ウェル | 約20 min/96 ウェル 約75 min/384 ウェル | 約20 min/96 ウェル 約75 min/384 ウェル |
| ダイナミックレンジ | 3.5 logs | 4.5 logs | 5.5 logs | 5.5 logs (PR1) 4.5 logs (PR2) |
| サンプルフォーマット | 96 ウェルプレート | 96 / 384 ウェルプレート | 96 / 384 ウェルプレート | 96 / 384 ウェルプレート |
| 測定可能プレックス数 | 80（非磁気は100） | 500 | 500 | 500 |
| 寸法（本体）1） | 幅 430 mm× 奥行 505 mm × 高さ 245 mm | 幅 584 mm× 奥行 653 mm × 高さ 547 mm | 幅 584 mm× 奥行 610 mm × 高さ 762 mm | 幅 584 mm× 奥行 610 mm × 高さ 762 mm |
| 重量（本体）1） | 25 kg | 77.1 kg | 54.4 kg | 54.4 kg |
マルチプレックスアッセイシステムとELISA 法との比較
40 検体（サンプル）中に含まれる10 種類のタンパク質を二重測定した場合
| マルチプレックスアッセイシステム | ELISA | |
|---|---|---|
 |  | |
| 特長 | 少量サンプルを多項目同時測定 | プレート毎に単項目測定 |
| 必要なプレート数 | 1枚 | 10枚 |
| 1検体毎に必要なサンプル量 | 50 μL*1 | 1,000 μL*2 |
| ダイナミックレンジ | 3-4 logs | 2-3 logs |
| 感度 | pg/mL | pg/mL |
| キットコスト | ¥340,000*3 | ¥980,000*4 |
ご注文情報
| Luminex シリーズ | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| Luminex® 200™ | FLEXMAP™ 3D | xMAP® INTELLIFLEX RUO | xMAP® INTELLIFLEX DRSE | ||
| 本体（機器） | カタログ番号 | 40-012J | 40-014J | INTELLIFLEX-RU0 | INTELLIFLEX-DRSE |
| 据付設置 | カタログ番号 | MX-INSTALL | LX-INSTALL | お問い合わせ | お問い合わせ |
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お問合せ先
メルク ライフサイエンス リサーチ事業部
E-mail：jpts@merckgroup.com
TEL：03-4531-1140
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