Chromatografia gazowa (GC)

Podobnie jak inne formy chromatografii, GC obejmuje fazę stacjonarną i fazę ruchomą. W GC faza ruchoma jest gazem obojętnym, zwykle helem lub azotem, a faza stacjonarna jest albo stałym adsorbentem, określanym jako chromatografia gaz-ciało stałe (GSC), albo cieczą zaadsorbowaną na obojętnym podłożu, określanym jako chromatografia gaz-ciecz (GLC lub po prostu GC).

Jak działa chromatografia gazowa?

Po pobraniu i przygotowaniu próbki, interesujące anality są oddzielane wewnątrz kolumny, a następnie detektor mierzy ilość składników, które opuszczają kolumnę. W GC analit jest wstrzykiwany do portu próbkowania urządzenia i wchodzi do pieca, gdzie jest odparowywany. Odparowana próbka jest transportowana przez kolumnę chromatograficzną przez przepływ gazu obojętnego, który tworzy fazę ruchomą. Związki w próbce rozdzielają się między fazą stacjonarną kolumny a gazem nośnym. Siła interakcji związku z fazą stacjonarną określa czas retencji analitu. Na wylocie kolumny detektor (MS lub nie-MS) wytwarza sygnał, gdy związki przechodzą przez niego. Chromatogram jest wynikiem separacji GC.

Aby zmierzyć stężenie badanej próbki, standardowa próbka o znanym stężeniu jest wstrzykiwana do instrumentu GC. Czas retencji piku i powierzchnia wzorca są porównywane z wynikami próbki testowej w celu określenia nieznanego stężenia. W GC, zewnętrzne i wewnętrzne standardy są powszechnie stosowane w celu zapewnienia wiarygodnej kwantyfikacji badanej próbki. Gdy znane standardy są uruchamiane oddzielnie od rzeczywistej próbki będącej przedmiotem zainteresowania, a odpowiedź jest porównywana z odpowiedzią próbki na innym chromatogramie, jest to określane jako standard zewnętrzny. Gdy standard jest dodawany do próbki i analizowany jednocześnie, nazywany jest standardem wewnętrznym.

Pobieranie próbek i przygotowanie do analizy GC

Wiele próbek może być analizowanych za pomocą GC, o ile związki są dość lotne (mogą być odparowane), a jednocześnie są stabilne termicznie (nie ulegają degradacji w wysokiej temperaturze). Próbki mogą być pobierane z materiałów stałych, ciekłych lub gazowych. Podczas przygotowywania próbek do GC ważne jest, aby zminimalizować złożoność próbki, ponieważ jakość próbki wpływa na dokładność i precyzję końcowych wyników chromatograficznych. Dostępna jest szeroka gama specyficznych dla matryc technik przygotowania próbek, które pomagają izolować i zatężać anality i matryce próbek przed analizą GC.

Jak wybrać kolumnę GC

Kolumna Kolumna GC jest sercem systemu GC, w którym zachodzi rozdział chromatograficzny. Wybór odpowiedniej kolumny GC powinien opierać się na 4 istotnych czynnikach: fazie stacjonarnej, średnicy wewnętrznej kolumny (I.D.), grubości warstwy i długości kolumny. Czynniki te mają wpływ na wydajność kolumny, rozdzielczość i pojemność próbki.

Fazę stacjonarną należy wybrać w oparciu o aplikację, która ma zostać wykonana.