70562

pET-42b(+) DNA - Novagen

Novagen′s pET-41a-c(+) and pET-42a-c(+) vectors incorporate the schistosomal glutathione-S-transferase (GST-Tag) coding sequence as a fusion partner.

• Synonim(y): Seria pET-42, Wektor pET-42a-c(+), Wektory pET- 41a-c(+) i pET- 42a-c(+)
• NACRES: NA.51
• UNSPSC Code: 41106610

Właściwości

• Quality Segment: 100
• manufacturer/tradename: Novagen^®
• storage condition: OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles
• technique(s): molecular cloning: suitable
• shipped in: dry ice, wet ice
• storage temp.: −70°C

Opis

General description

Wektory pET-41a-c(+) i pET-42a-c(+) zawierają sekwencję kodującą schistosomalną glutationo-S-transferazę (GST; GST-Tag) jako partnera fuzyjnego. Sekwencja GST-Tag zwiększa produkcję i w niektórych przypadkach rozpuszczalność partnerów fuzji (Smith 1998). Białka fuzyjne GST-Tag po ekspresji w rozpuszczalnej, prawidłowo sfałdowanej formie mogą być oczyszczane za pomocą unieruchomionego glutationu. Delikatną elucję uzyskuje się za pomocą buforów zawierających zredukowany glutation. Ilościowe oznaczenie rozpuszczalnych fuzji GST jest również możliwe poprzez oznaczenie aktywności transferazy. Serie pET-41 i -42 posiadają silny promotor T7lac i kodują sekwencję GST-Tag (220 aa), miejsca proteolityczne, sekwencję His-Tag (6 aa) i sekwencję S-Tag (15 aa).

W przeciwieństwie do innych dostępnych na rynku wektorów fuzyjnych GST, miejsca cięcia proteolitycznego Xa (IleGluGlyArg, seria pET-42) i enterokinazy (AspAspAspAspLys, seria pET-41) zostały zaprojektowane tak, aby umożliwić usunięcie 100% sekwencji zakodowanych w wektorze i generowanie natywnych białek z ich autentycznymi resztami N-końcowymi. Nieskondensowane białka mogą być wytwarzane przy użyciu miejsca klonowania Nde I. Wersja pET-41 jest dostępna jako wektor liniowy przygotowany do klonowania niezależnego od ligacji (LIC) produktów PCR.

Innym wektorem pET z sekwencją GST-Tag jest pET-49b(+). Więcej informacji można znaleźć w opisie na stronie internetowej. Sekwencje His-Tag i S-Tag umożliwiają wykonywanie alternatywnych procedur wykrywania i oczyszczania białek. Na przykład podczas zwiększania czystości za pomocą oddzielnej metody oczyszczania lub podczas oczyszczania w warunkach denaturujących.

Seria pET-41 jest przeznaczona do klonowania i ekspresji na wysokim poziomie sekwencji peptydowych połączonych z białkiem GST-Tag o masie 220 aa. Należy pamiętać, że sekwencja jest numerowana zgodnie z konwencją pBR322, więc region ekspresji T7 jest odwrócony na mapie wektora (TB239). Pochodzenie f1 jest zorientowane tak, że infekcja fagiem pomocniczym wytworzy wiriony zawierające jednoniciowy DNA, który odpowiada nici kodującej. Sekwencję kodowaną przez wektor można całkowicie usunąć podczas klonowania w miejscu PshAI (jak pokazano poniżej), a następnie rozszczepiając białko fuzyjne GST za pomocą enterokinazy.

Wektory pET są dostarczane jako oczyszczone plazmidowe DNA (10 µg). Każde zamówienie pET DNA obejmuje również szczep kontrolny indukcji (dostarczany jako zapas glicerolu). W celu uzyskania dodatkowych informacji prosimy o kontakt z działem technicznym.

Other Notes

Smith, D.B. i Johnson, K.S. 1988. Gene 67, 31.

Legal Information

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Ten produkt jest sprzedawany wyłącznie do wewnętrznego użytku badawczego. Jakiekolwiek komercyjne wykorzystanie tego produktu, jego składników i/lub jego pochodnych (w tym, ale nie wyłącznie, białek wyprodukowanych przy użyciu produktu lub jego składników) (zwanych dalej łącznie "Produktem EMD") wymaga podpisania pisemnej umowy komercyjnego wykorzystania z EMD Millipore Corporation lub jej następcą prawnym. Użytkowanie komercyjne obejmuje między innymi: (1) wykorzystanie Produktu EMD do wytwarzania produktów przeznaczonych do sprzedaży osobom trzecim; (2) wykorzystanie Produktu EMD do świadczenia usług, dostarczania informacji lub danych osobom trzecim w zamian za wynagrodzenie; (3) wykorzystanie Produktu EMD do celów terapeutycznych, diagnostycznych lub profilaktycznych (w tym jako część urządzenia, chipa, testu lub innego produktu); lub (4) odsprzedaż Produktu EMD, niezależnie od tego, czy taki Produkt EMD jest odsprzedawany do celów badawczych. Żadne z postanowień zawartych w niniejszym dokumencie nie stanowi ani nie gwarantuje, że do korzystania z Produktu EMD nie są wymagane dodatkowe prawa osób trzecich. Wszelkie pytania dotyczące ograniczeń użytkowania należy kierować na adres: licensing@milliporesigma.com.

Ten produkt zawiera organizmy zmodyfikowane genetycznie (GMO). W UE GMO są regulowane odpowiednio dyrektywami 2001/18/WE i 2009/41/WE Parlamentu Europejskiego i Rady oraz ich krajową implementacją w państwach członkowskich. Przepisy te zobowiązują MilliporeSigma do żądania pewnych informacji o użytkowniku i zakładzie, w którym przetwarzane są GMO. Clickhere for Enduser Declaration (EUD) Form.

Toksyczność: Standardowa obsługa

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids