70633
Zestaw wprowadzający do klonowania pETBlue-1 Perfectly Blunt® - Novagen
Synonim(y):
Idealnie tępe zestawy do klonowania, Wektor pETBlue-1, Wektory pETBlue, Zestaw do klonowania Novagen pETBlue-1 Perfectly Blunt Cloning Kit
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Wybierz wielkość
Zmień widok
| Rozmiar/SKU | Dostępność | Cena netto |
|---|---|---|
10 reactions | Skontaktuj się z Obsługą Klienta, aby uzyskać informacje na temat dostępności | 1260,00 zł |
Informacje o tej pozycji
NACRES:
NA.54
UNSPSC Code:
41106610
1260,00 zł
Skontaktuj się z Obsługą Klienta, aby uzyskać informacje na temat dostępności
Pomoc techniczna
Potrzebujesz pomocy? Nasz zespół doświadczonych naukowców chętnie Ci pomoże.
Pozwól nam pomócmanufacturer/tradename
Novagen®
Quality Segment
storage condition
OK to freeze
shipped in
dry ice
storage temp.
−70°C
General description
Zestawy do klonowania Perfectly Blunt® są przeznaczone do uproszczonego klonowania DNA generowanego metodą PCR przy użyciu dowolnego typu polimerazy DNA. Podejście to umożliwia wykorzystanie enzymów korekcyjnych o wysokiej wierności do amplifikacji, zmniejszając w ten sposób prawdopodobieństwo generowania mutacji w sekwencji docelowej. Ponadto, w wielu warunkach klonowanie tępe jest bardziej wydajne niż klonowanie T, najprawdopodobniej ze względu na obserwację, że wydajność dodawania pojedynczego dA przez polimerazę Taq DNA różni się znacznie w zależności od kontekstu sekwencji końców DNA, a nawet liczby wykonanych cykli PCR (Novy 1996, Clark 1998, Brownstein 1996, Magnuson, 1996, Hu 1993).
Dzięki protokołowi klonowania Perfectly Blunt można przejść od produktu PCR do umieszczenia transformantów na płytkach w mniej niż godzinę przy minimalnym nakładzie pracy. Gotowy produkt PCR jest przekształcany w tępą, fosforylowaną formę w 15-minutowej reakcji przy użyciu wstępnie zmieszanych odczynników. Po 5-minutowym etapie inaktywacji cieplnej, przetworzony insert jest łączony z gotowym do użycia wektorem i ligowany w zoptymalizowanej 15-minutowej reakcji. Ekskluzywna 8-minutowa procedura transformacji przy użyciu wysoce wydajnych kompetentnych komórek NovaBlue Singles (nr kat. 70181) generuje rekombinowane kolonie, które można łatwo wizualizować za pomocą niebiesko-białego badania przesiewowego.
Należy pamiętać, że metoda Perfectly Blunt nie ogranicza się do klonowania produktów PCR; zestawy te nadają się również do klonowania fragmentów restrykcyjnych, cDNA lub ściętego DNA przy użyciu tych samych protokołów.
W zestawach do klonowania Perfectly Blunt® dostępnych jest siedem różnych wektorów. Wybór wektorów obejmuje te zaprojektowane do ogólnego klonowania, sekwencjonowania, optymalnej transkrypcji/translacji in vitro i optymalnej ekspresji białek w E. coli. Każdy wektor jest dostępny w zestawie zawierającym odczynniki wystarczające na 10, 20 lub 40 reakcji.
Zestawy "tylko wektorowe" są również dostępne w rozmiarach 20 i 40 reakcji bez ligazy i komórek kompetentnych. Aby uzyskać komórki kompetentne o wyższej wydajności, patrz także pSTBlue-1 Perfectly Blunt Giga Cloning Kit (nr kat. 71229).
Wektor pETBlue-1 został zaprojektowany do identyfikacji rekombinantów za pomocą tradycyjnego niebiesko-białego badania przesiewowego, jednocześnie umożliwiając ekspresję genów docelowych w oparciu o promotor T7lac. Badanie przesiewowe jest niezależne od ekspresji, ponieważ promotor ekspresji T7lac znajduje się w przeciwnej orientacji w stosunku do promotora E. coli, który pośredniczy w niebiesko-białym badaniu przesiewowym. pETBlue-1 ułatwia ekspresję natywnych białek bez fuzji i umożliwia wygodne subklonowanie genów docelowych już połączonych z istniejącymi znacznikami wykrywania i oczyszczania. Miejsce klonowania EcoR V jest odpowiednio oddalone od miejsca wiązania rybosomu E. coli. Wstawki muszą kodować kodon startowy ATG na ich 5′ końcu, jeśli pożądana jest ekspresja. Sekwencja jest numerowana od pierwszej zasady sekwencji promotora T7.
Oprócz systemów pETBlue, które zawierają niecięte plazmidy, wektory pETBlue są dostępne w formatach gotowych do wstawienia produktów PCR. Dostępne są dwa rodzaje zestawów: AccepTor Vector Kits i Perfectly Blunt® Cloning Kits. AccepTor Vector Kit umożliwia bezpośrednią insercję DNA zawierającego pojedyncze zwisy 3′-dA, takie jak te amplifikowane za pomocą polimeraz DNA bez proofreadingu (np. NovaTaq DNA Polymerase), podczas gdy Perfectly Blunt Cloning Kits są przeznaczone do klonowania insertów posiadających dowolny typ końca DNA.
Dzięki protokołowi klonowania Perfectly Blunt można przejść od produktu PCR do umieszczenia transformantów na płytkach w mniej niż godzinę przy minimalnym nakładzie pracy. Gotowy produkt PCR jest przekształcany w tępą, fosforylowaną formę w 15-minutowej reakcji przy użyciu wstępnie zmieszanych odczynników. Po 5-minutowym etapie inaktywacji cieplnej, przetworzony insert jest łączony z gotowym do użycia wektorem i ligowany w zoptymalizowanej 15-minutowej reakcji. Ekskluzywna 8-minutowa procedura transformacji przy użyciu wysoce wydajnych kompetentnych komórek NovaBlue Singles (nr kat. 70181) generuje rekombinowane kolonie, które można łatwo wizualizować za pomocą niebiesko-białego badania przesiewowego.
Należy pamiętać, że metoda Perfectly Blunt nie ogranicza się do klonowania produktów PCR; zestawy te nadają się również do klonowania fragmentów restrykcyjnych, cDNA lub ściętego DNA przy użyciu tych samych protokołów.
W zestawach do klonowania Perfectly Blunt® dostępnych jest siedem różnych wektorów. Wybór wektorów obejmuje te zaprojektowane do ogólnego klonowania, sekwencjonowania, optymalnej transkrypcji/translacji in vitro i optymalnej ekspresji białek w E. coli. Każdy wektor jest dostępny w zestawie zawierającym odczynniki wystarczające na 10, 20 lub 40 reakcji.
Zestawy "tylko wektorowe" są również dostępne w rozmiarach 20 i 40 reakcji bez ligazy i komórek kompetentnych. Aby uzyskać komórki kompetentne o wyższej wydajności, patrz także pSTBlue-1 Perfectly Blunt Giga Cloning Kit (nr kat. 71229).
Wektor pETBlue-1 został zaprojektowany do identyfikacji rekombinantów za pomocą tradycyjnego niebiesko-białego badania przesiewowego, jednocześnie umożliwiając ekspresję genów docelowych w oparciu o promotor T7lac. Badanie przesiewowe jest niezależne od ekspresji, ponieważ promotor ekspresji T7lac znajduje się w przeciwnej orientacji w stosunku do promotora E. coli, który pośredniczy w niebiesko-białym badaniu przesiewowym. pETBlue-1 ułatwia ekspresję natywnych białek bez fuzji i umożliwia wygodne subklonowanie genów docelowych już połączonych z istniejącymi znacznikami wykrywania i oczyszczania. Miejsce klonowania EcoR V jest odpowiednio oddalone od miejsca wiązania rybosomu E. coli. Wstawki muszą kodować kodon startowy ATG na ich 5′ końcu, jeśli pożądana jest ekspresja. Sekwencja jest numerowana od pierwszej zasady sekwencji promotora T7.
Oprócz systemów pETBlue, które zawierają niecięte plazmidy, wektory pETBlue są dostępne w formatach gotowych do wstawienia produktów PCR. Dostępne są dwa rodzaje zestawów: AccepTor Vector Kits i Perfectly Blunt® Cloning Kits. AccepTor Vector Kit umożliwia bezpośrednią insercję DNA zawierającego pojedyncze zwisy 3′-dA, takie jak te amplifikowane za pomocą polimeraz DNA bez proofreadingu (np. NovaTaq DNA Polymerase), podczas gdy Perfectly Blunt Cloning Kits są przeznaczone do klonowania insertów posiadających dowolny typ końca DNA.
Features and Benefits
- Brak enzymów restrykcyjnych lub specjalnych starterów
- Kompatybilność z dowolną polimerazą DNA
- Niezależny od dodatku 3ʹ-dA lub kontekstu sekwencji końców DNA
- Niebieski/biały screening z siedmioma różnymi wektorami, w tym wektorami ekspresyjnymi pETBlue
- Prosty protokół zajmuje mniej niż jedną godzinę* od produktu PCR do posiewu transformantów
Other Notes
Novy, R.E., et al. 1996. inNovations 6, 7. Clark, J.M. 1988. Nucleic Acids Res. 16, 9677. Brownstein, J.M., et al. 1996. BioTechniques 20, 1004. Magnuson, V.L., et al. 1996. BioTechniques 21, 700. Hu, G. 1993. DNA and Cell Biology 12, 763.
Legal Information
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Perfectly Blunt is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Toksyczność: Wiele wartości toksyczności, patrz MSDS
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
1 of 1
Ta pozycja | |||
|---|---|---|---|
| description - | description - | description - | description - |
| storage temp. −70°C | storage temp. - | storage temp. −70°C | storage temp. −70°C |
| shipped in dry ice | shipped in - | shipped in dry ice | shipped in dry ice |
| Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 100 |
| storage condition OK to freeze | storage condition - | storage condition OK to freeze | storage condition OK to freeze |
| manufacturer/tradename Novagen® | manufacturer/tradename - | manufacturer/tradename Novagen® | manufacturer/tradename Novagen® |
PCR cloning kit with high-fidelity enzymes | - | - | non-proofreading DNA polymerase cloning kit, Novagen pETBlue-1 vector cloning kit, recombinant Taq polymerase pETBlue-1 kit, AccepTor Vector Kit for transformation, laboratory cloning expression reagents, 3′ dA overhang cloning vector kit, KOD XL polymerase AccepTor Vector Kit, pETBlue-1 cloning vector kit Sigma-Aldrich, PCR cloning pETBlue-1 vector kit, Sigma-Aldrich cloning and expression kit, dU to dT conversion vector kit, pETBlue-1 AccepTor Vector Kit, direct ligation pETBlue-1 AccepTor Vector, pETBlue-1 vector for gene cloning |
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.