APT403
CaspaTag Caspase 3,7 In Situ Assay Kit, fluoresceina
The In Situ Caspase Detection Kit for Flow Cytometry use a novel approach to detect active caspases. The methodology is based on Fluorochrome Inhibitors of Caspases (FLICA).
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Wybierz wielkość
Zmień widok
Informacje o tej pozycji
UNSPSC Code:
12161503
NACRES:
NA.84
eCl@ss:
32161000
Pomoc techniczna
Potrzebujesz pomocy? Nasz zespół doświadczonych naukowców chętnie Ci pomoże.
Pozwól nam pomócQuality Segment
species reactivity (predicted by homology)
mammals
manufacturer/tradename
CaspaTag, Chemicon®
technique(s)
activity assay: suitable, flow cytometry: suitable
NCBI accession no.
detection method
fluorometric
shipped in
wet ice
Gene Information
human ... CASP3(836)
General description
Apoptoza jest ewolucyjnie zachowaną formą samobójstwa komórek, która następuje w wyniku wyspecjalizowanego procesu komórkowego. Centralnym elementem tego procesu jest kaskada enzymów proteolitycznych zwanych kaspazami. Enzymy te uczestniczą w serii reakcji, które są wyzwalane w odpowiedzi na sygnały proapoptotyczne i powodują rozszczepienie substratów białkowych, powodując demontaż komórki (Slee i in. 1999).
Kaspazy zostały zidentyfikowane w organizmach od C. elegans do ludzi. Kaspazy ssaków odgrywają różne role w apoptozie i zapaleniu. W apoptozie, kaspazy są odpowiedzialne za proteolityczne rozszczepienia, które prowadzą do rozpadu komórki (kaspazy efektorowe) i są zaangażowane w poprzedzające zdarzenia regulacyjne (kaspazy inicjatorowe). Aktywna kaspaza składa się z dwóch dużych i dwóch małych podjednostek, które tworzą dwa heterodimery łączące się w tetramer (Walker i wsp. 1994; Wilson i wsp. 1994; Rotonda i wsp. 1996). Podobnie jak inne proteazy, kaspazy są syntetyzowane jako prekursory, które ulegają dojrzewaniu proteolitycznemu, autokatalitycznie lub w kaskadzie przez enzymy o podobnej specyficzności (Kumar 1999).
Enzymy kaspazowe specyficznie rozpoznają sekwencję 4 lub 5 aminokwasów na docelowym substracie, który koniecznie zawiera resztę kwasu asparaginowego. Reszta ta jest celem rozszczepienia, które zachodzi na karbonylowym końcu reszty kwasu asparaginowego (Thornberry et al. 1997). Kaspazy mogą być wykrywane poprzez immunoprecypitację, techniki immunoblottingu przy użyciu przeciwciał specyficznych dla kaspaz lub poprzez zastosowanie substratów fluorochromowych, które stają się fluorescencyjne po rozszczepieniu przez kaspazę.
Zasada testu:
Zestawy CHEMICON do wykrywania kaspaz in situ wykorzystują nowatorskie podejście do wykrywania aktywnych kaspaz. Metodologia opiera się na fluorochromowych inhibitorach kaspaz (FLICA). Inhibitory są przepuszczalne dla komórek i niecytotoksyczne. Po wejściu do komórki inhibitor wiąże się kowalencyjnie z aktywną kaspazą (Ekert et al. 1999). Ten zestaw wykorzystuje znakowany karboksyfluoresceiną fluorometyloketonowy peptydowy inhibitor kaspazy-3 (FAM-DEVD-FMK), który wytwarza zieloną fluorescencję. Po dodaniu do populacji komórek, sonda FAM-DEVD-FMK wchodzi do każdej komórki i kowalencyjnie wiąże się z reaktywną resztą cysteiny, która znajduje się na dużej podjednostce aktywnego heterodimeru kaspazy, hamując w ten sposób dalszą aktywność enzymatyczną. Związany znakowany odczynnik jest zatrzymywany w komórce, podczas gdy niezwiązany odczynnik dyfunduje z komórki i jest wypłukiwany. Zielony sygnał fluorescencyjny jest bezpośrednią miarą ilości aktywnej kaspazy-3 lub kaspazy-7 obecnej w komórce w momencie dodania odczynnika. Komórki zawierające związany znakowany odczynnik mogą być analizowane za pomocą fluorometrii opartej na płytkach 96-dołkowych, mikroskopii fluorescencyjnej lub cytometrii przepływowej.
Zastosowanie:
CHEMICON In Situ FLICA Caspase-3/7 Detection Kit to oparty na fluorescencji test do wykrywania aktywnej kaspazy-3 lub kaspazy-7 w komórkach przechodzących apoptozę. Zestaw jest przeznaczony wyłącznie do użytku badawczego. Nie jest przeznaczony do stosowania w procedurach diagnostycznych lub terapeutycznych.
Kaspazy zostały zidentyfikowane w organizmach od C. elegans do ludzi. Kaspazy ssaków odgrywają różne role w apoptozie i zapaleniu. W apoptozie, kaspazy są odpowiedzialne za proteolityczne rozszczepienia, które prowadzą do rozpadu komórki (kaspazy efektorowe) i są zaangażowane w poprzedzające zdarzenia regulacyjne (kaspazy inicjatorowe). Aktywna kaspaza składa się z dwóch dużych i dwóch małych podjednostek, które tworzą dwa heterodimery łączące się w tetramer (Walker i wsp. 1994; Wilson i wsp. 1994; Rotonda i wsp. 1996). Podobnie jak inne proteazy, kaspazy są syntetyzowane jako prekursory, które ulegają dojrzewaniu proteolitycznemu, autokatalitycznie lub w kaskadzie przez enzymy o podobnej specyficzności (Kumar 1999).
Enzymy kaspazowe specyficznie rozpoznają sekwencję 4 lub 5 aminokwasów na docelowym substracie, który koniecznie zawiera resztę kwasu asparaginowego. Reszta ta jest celem rozszczepienia, które zachodzi na karbonylowym końcu reszty kwasu asparaginowego (Thornberry et al. 1997). Kaspazy mogą być wykrywane poprzez immunoprecypitację, techniki immunoblottingu przy użyciu przeciwciał specyficznych dla kaspaz lub poprzez zastosowanie substratów fluorochromowych, które stają się fluorescencyjne po rozszczepieniu przez kaspazę.
Zasada testu:
Zestawy CHEMICON do wykrywania kaspaz in situ wykorzystują nowatorskie podejście do wykrywania aktywnych kaspaz. Metodologia opiera się na fluorochromowych inhibitorach kaspaz (FLICA). Inhibitory są przepuszczalne dla komórek i niecytotoksyczne. Po wejściu do komórki inhibitor wiąże się kowalencyjnie z aktywną kaspazą (Ekert et al. 1999). Ten zestaw wykorzystuje znakowany karboksyfluoresceiną fluorometyloketonowy peptydowy inhibitor kaspazy-3 (FAM-DEVD-FMK), który wytwarza zieloną fluorescencję. Po dodaniu do populacji komórek, sonda FAM-DEVD-FMK wchodzi do każdej komórki i kowalencyjnie wiąże się z reaktywną resztą cysteiny, która znajduje się na dużej podjednostce aktywnego heterodimeru kaspazy, hamując w ten sposób dalszą aktywność enzymatyczną. Związany znakowany odczynnik jest zatrzymywany w komórce, podczas gdy niezwiązany odczynnik dyfunduje z komórki i jest wypłukiwany. Zielony sygnał fluorescencyjny jest bezpośrednią miarą ilości aktywnej kaspazy-3 lub kaspazy-7 obecnej w komórce w momencie dodania odczynnika. Komórki zawierające związany znakowany odczynnik mogą być analizowane za pomocą fluorometrii opartej na płytkach 96-dołkowych, mikroskopii fluorescencyjnej lub cytometrii przepływowej.
Zastosowanie:
CHEMICON In Situ FLICA Caspase-3/7 Detection Kit to oparty na fluorescencji test do wykrywania aktywnej kaspazy-3 lub kaspazy-7 w komórkach przechodzących apoptozę. Zestaw jest przeznaczony wyłącznie do użytku badawczego. Nie jest przeznaczony do stosowania w procedurach diagnostycznych lub terapeutycznych.
Application
Zestaw In Situ Caspase Detection Kit do cytometrii przepływowej wykorzystuje nowatorskie podejście do wykrywania aktywnych kaspaz. Metodologia opiera się na fluorochromowych inhibitorach kaspaz (FLICA).
Research Category
Apoptosis & Cancer
Apoptosis & Cancer
Preparation Note
- Nieotwarte materiały zestawu należy przechowywać w temperaturze 2-8°C do daty ich ważności.
- Odtworzony odczynnik FLICA (150X) należy zamrozić w temperaturze -20°C na okres do 6 miesięcy i w tym czasie można go dwukrotnie rozmrozić. W razie potrzeby rozdzielić do oddzielnych bursztynowych probówek. Chronić przed światłem przez cały czas.
- Przechowywać rozcieńczony (1X) bufor płuczący w temperaturze do -20ºC przez 2 tygodnie.
- Odtworzony odczynnik FLICA (150X) należy zamrozić w temperaturze -20°C na okres do 6 miesięcy i w tym czasie można go dwukrotnie rozmrozić. W razie potrzeby rozdzielić do oddzielnych bursztynowych probówek. Chronić przed światłem przez cały czas.
- Przechowywać rozcieńczony (1X) bufor płuczący w temperaturze do -20ºC przez 2 tygodnie.
Other Notes
FLICA Reagent (FAM-DEVD-FMK): Four lyophilized vials
10X Wash Buffer: 60 mL
Fixative: 6 mL
Propidium Iodide: 1 mL at 250 μg/mL, ready-to-use
Hoechst Stain: 1 mL at 200 μg/mL, ready-to-use
10X Wash Buffer: 60 mL
Fixative: 6 mL
Propidium Iodide: 1 mL at 250 μg/mL, ready-to-use
Hoechst Stain: 1 mL at 200 μg/mL, ready-to-use
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Still not finding the right product?
Explore all of our products under CaspaTag Caspase 3,7 In Situ Assay Kit, fluoresceina
signalword
Danger
Hazard Classifications
Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Oral - Carc. 1B - Eye Irrit. 2 - Muta. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1 - STOT SE 2 - STOT SE 3
target_organs
Eyes,Central nervous system, Respiratory system
Klasa składowania
6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.