ECM671

QCM Gelatin Invadopodia Assay (czerwony)

• UNSPSC Code: 12161503
• NACRES: NA.76
• eCl@ss: 32161000

Właściwości

• Quality Segment: 100
• technique(s): cell invasion: suitable, cell migration: suitable
• detection method: fluorometric

Opis

Application

EMD Millipore QCM Gelatin Invadopodia Assay (Red) zapewnia odczynniki niezbędne do umieszczenia cienkiej, jednolitej warstwy żelatyny znakowanej Cy3 na szklanym podłożu hodowlanym, umożliwiając szybkie wykrywanie degradacji matrycy (Artym i in., 2009, Xu i in., 2009). Powłoka poli-L-lizyny jest najpierw adsorbowana na szklanym podłożu. Podłoże jest następnie traktowane rozcieńczonym roztworem aldehydu glutarowego w celu dwufunkcyjnej "aktywacji" powierzchni do dalszego wiązania białek. Późniejsza inkubacja powierzchni z fluorescencyjną żelatyną umożliwia kowalencyjne sprzężenie między poli-L-lizyną i żelatyną poprzez reaktywne grupy aldehydowe (-CHO). Pokryte fluorescencyjnie szkło jest teraz przygotowywane do hodowli komórkowej poprzez dezynfekcję 70% etanolem, a następnie wygaszanie wolnych aldehydów pożywką zawierającą aminokwasy. Po zakończeniu przygotowywania podłoża fluorescencyjnego, interesujące typy komórek mogą być wysiewane na powierzchnię żelatyny przez pożądany czas. W zależności od typu komórek, degradacja może nastąpić w ciągu kilku do kilkunastu godzin. Interesujące związki lecznicze mogą być również wprowadzane w okresie hodowli.

Dzięki testowi QCM Gelatin Invadopodia Assay (Red) firmy EMD Millipore, zdegradowane obszary żelatyny, teraz pozbawione fluorescencji, można wizualizować mikroskopowo i określać ilościowo za pomocą algorytmów oprogramowania do analizy obrazu. Test zapewnia również fluorescencyjną FITC-falloidynę i DAPI, odpowiednio do wizualizacji cytoszkieletu F-aktyny i jąder, aby umożliwić kolokalizację degradacji z cechami komórkowymi. Potencjalne aktywatory lub inhibitory tworzenia inwadopodiów mogą być badane pod kątem ich wpływu na stopień i częstotliwość degradacji macierzy, a test może być dalej łączony z barwieniem immunocytochemicznym dla innych cząsteczek interesujących w badaniach szlaków.

Packaging

Wystarczająca ilość odczynników dla 4 x 8-dołkowych szkiełek komorowych (32 testy)

Preparation Note

Przechowywać Cy3^™-żelatynę, nieoznakowaną żelatynę, poli-L-lizynę i DAPI w temperaturze 2-8°C. Glutaraldehyd i FITC-falloidynę przechowywać w temperaturze -20°C. Zużyć wszystkie odczynniki w ciągu 4 miesięcy od daty otrzymania.

Other Notes

Cy3^™-Gelatin, 4X: One vial containing 0.5 mL Unlabeled Gelatin, 4X: One vial containing 2 mL DAPI: One vial containing 100 µL at 100 µg/mL in water Poly-L-Lysine, 2X: One vial containing 5 mL Glutaraldehyde, 16X: One vial containing 1 mL FITC-Phalloidin: One vial containing 20 µg

Legal Information

Cy3 is a trademark of Cytiva

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Słowo ostrzegawcze: Danger
• Ostrzeżenia: P261 - P273 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338
• Narządy docelowe: Respiratory system
• supp_hazards: EUH071
• Klasa składowania: 6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
• Piktogramy: GHS06,GHS08,GHS05
• Kody zagrożeń: H300,H314,H317,H332,H334,H335,H412
• Hazard Classifications: Acute Tox. 2 Oral - Acute Tox. 4 Inhalation - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1B - Skin Sens. 1 - STOT SE 3
• Co się dzieje?: WGK 3