HTS071M

Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor chemoatraktantu ChemR23

Human ChemR23 / CMKLR1 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

• UNSPSC Code: 41106514
• NACRES: NA.84
• eCl@ss: 32161000

Właściwości

• Nazwa produktu: Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor chemoatraktantu ChemR23, Human ChemR23 / CMKLR1 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
• biological source: human
• recombinant: expressed in Chem-1 cells
• manufacturer/tradename: ChemiScreen; Chemicon^®
• technique(s): ligand binding assay: suitable (GTPγS); radioligand binding assay (RLBA): suitable
• NCBI accession no.: NM_004072.1
• UniProt accession no.: Q99788
• shipped in: dry ice
• Quality Level: 100

Opis

Application

Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.

Features and Benefits

WARUNKI INUKCJI
WARUNKI ASSAY: Membrany są permeabilizowane przez dodanie saponiny do równego stężenia masowego, a następnie mieszane z^[35S]-GTPγS (końcowe stężenie 0,3 nM) w 20 mM HEPES, pH 7,4/100 mM NaCl/10 mM MgCl2/0,5 μM GDP w niewiążącej 96-dołkowej płytce. Nieznakowaną chemerynę dodano do końcowego stężenia wskazanego na rysunku 1 (końcowa objętość 100 μL) i inkubowano przez 30 minut w temperaturze 30°C. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną GF/B (Millipore MAHF B1H) uprzednio zwilżoną wodą. Płytka jest płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) zimnym 10 mM fosforanem sodu, pH 7,4, a następnie suszona i liczona.

Jedna fiolka zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da więcej niż 1000 cpm specyficznego wiązania [^35S]-GTPγS stymulowanego chemeryną.

Oczekuje się, że preparat błonowy ChemR23 będzie funkcjonalny w teście wiązania radioligandu; jednak użytkownik końcowy będzie musiał określić optymalny ligand znakowany radioligandem do stosowania z tym produktem.

General description

ChemR23 został odkryty jako sierocy receptor spokrewniony z receptorami chemoatrakcyjnymi C3a, C5a i FPR1 i ulega ekspresji na komórkach dendrytycznych i makrofagach (Samson i in., 1998). Ligand dla ChemR23 został scharakteryzowany jako chemeryna, proteolitycznie przetworzone białko o masie 15 kD występujące w miejscach zapalnych; 9 aminokwasowy peptyd z C-końca chemeryny jest wystarczający do aktywacji ChemR23 (Wittamer i in., 2003, 2004). Chemerin wyrażany w śródbłonku limfoidalnym i mikronaczyniowym pośredniczy w migracji komórek dendrytycznych eksprymujących ChemR23 do narządów limfoidalnych i naczyń krwionośnych w miejscach zapalenia (Vermi i in., 2005). Ponadto stwierdzono, że bioaktywny lipid, resolwina E1, funkcjonalnie oddziałuje z ChemR23 w celu zmniejszenia stanu zapalnego (Arita i in., 2005). Preparaty błonowe ChemR23 firmy Millipore to surowe preparaty błonowe wykonane z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych interakcji ChemR23 z jego ligandami. Preparaty błonowe wykazują EC50 0,37 nM dla chemeryny w teście wiązania GTPγS.

Ludzki ChemR23 o pełnej długości

Physical form

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 1 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C

Preparation Note

Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Analysis Note

SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 μg
EC50 in GTPγS binding assay by Chemerin: ~ 0.37 nM

Biochem/physiol Actions

GPCR Class: A

Protein Target: ChemR23 / CMKLR1

Target Sub-Family: Chemoattractant

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2