MAB3406
Przeciwciało anty-Cytokeratin Pan, klon Lu5
clone Lu5, Chemicon®, from mouse
Zaloguj się aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe
Wybierz wielkość
40 μG
1860,00 zł
Informacje o tej pozycji
Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Przejdź do
Pomoc techniczna
Potrzebujesz pomocy? Nasz zespół doświadczonych naukowców chętnie Ci pomoże.
Pozwól nam pomócpochodzenie biologiczne
mouse
forma przeciwciała
purified antibody
rodzaj przeciwciała
primary antibodies
klon
Lu5, monoclonal
reaktywność gatunkowa (przewidywana na podstawie homologii)
mammals
producent / nazwa handlowa
Chemicon®
metody
immunohistochemistry: suitable
izotyp
IgG1
Warunki transportu
wet ice
1 of 4
Ta pozycja | MAB3077 | CBL266 | MAB1612 |
|---|---|---|---|
| biological source mouse | biological source mouse | biological source mouse | biological source mouse |
| antibody form purified antibody | antibody form purified immunoglobulin | antibody form purified antibody | antibody form purified immunoglobulin |
| clone Lu5, monoclonal | clone L5, monoclonal | clone LH1, monoclonal | clone AE1, monoclonal |
| technique(s) immunohistochemistry: suitable | technique(s) western blot: suitable | technique(s) immunohistochemistry: suitable, western blot: suitable | technique(s) immunohistochemistry: suitable (paraffin) |
| shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in wet ice |
| isotype IgG1 | isotype IgG2b | isotype IgG1 | isotype IgG |
Immunogen
Linie komórkowe nowotworów płuc A549 i A2182.
Zastosowanie
Immunohistochemia: 10-20 μg/ml Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.
Charakterystyka guza
Do charakterystyki guza zalecany jest dwuetapowy test eksperymentalny:
1. Określenie pochodzenia tkankowego guza za pomocą anty-cytokeratyny pan, anty-desminy, anty-kwasowego białka fibrylarnego gleju, anty-neurofilamentu i anty-wimentyny.
2. Charakterystyka guza nabłonkowego za pomocą przeciwciał przeciwko klasom cytokeratyn, które są charakterystyczne dla różnych tkanek, np. anty-cytokeratyna nr 7, anty-cytokeratyna nr 18. Materiał próbki: Normalna tkanka, tkanka guza po zabiegu chirurgicznym lub do 24 godzin po autopsji, zamrożone skrawki lub utrwalone formaldehydem skrawki zatopione w parafinie,
Metoda wykrywania
Analiza immunohistochemiczna (wykrywanie pierwotnego przeciwciała, np. za pomocą anty-mysiej Ig-peroksydazy lub anty-mysiej Ig-FITC).
Procedura:
Idealne zamrożone skrawki uzyskuje się z próbek tkanek zamrożonych szokowo. Zamrożone skrawki są suszone na powietrzu, a następnie utrwalane acetonem przez 5-10 minut w temperaturze od -15 do -25°C. Nadmiar acetonu odparowuje się w temperaturze 15-25°C. Można również użyć materiału utrwalonego w alkoholu.
Preparaty z cytowirówki pojedynczych komórek lub rozmazów komórkowych są również utrwalane w acetonie. Preparaty te nie powinny być jednak suszone na powietrzu, nadmiar acetonu jest usuwany przez krótkie płukanie w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS). Dalsze postępowanie jest następujące:
- Nałożyć na preparat 10 - 20 μL roztworu przeciwciał i inkubować w wilgotnej komorze przez 30 - 60 min w temperaturze 15-25°C.
- Zanurzyć szkiełko na krótko w PBS, a następnie płukać w PBS 3 razy po 3 minuty (za każdym razem używając świeżej kąpieli PBS).
- Wytrzeć brzegi preparatu do sucha, nałożyć na preparat 10-20 μL roztworu anty-mysiej lg-FITC lub anty-mysiej Ig-peroksydazy i pozostawić do inkubacji w wilgotnej komorze przez 30 min w temperaturze 15-25°C.
Przepłukać szkiełko w PBS, jak opisano powyżej.
Nie wolno dopuścić do wyschnięcia preparatu podczas któregokolwiek z etapów. Jeśli stosuje się technikę immunofluorescencji pośredniej, preparat należy pokryć odpowiednim podłożem do zatapiania (np. Mowiol, Hoechst) i zbadać pod mikroskopem fluorescencyjnym. Jeśli jako przeciwciało drugorzędowe stosuje się koniugat POD, preparat należy pokryć roztworem substratu (patrz poniżej) i inkubować w temperaturze 15-25°C, aż pojawi się wyraźnie widoczny czerwono-brązowy kolor. Kontrola negatywna (np. tylko znakowane przeciwciało drugorzędowe) powinna pozostać niezmieniona w kolorze podczas tego okresu inkubacji.
Następnie substrat jest wypłukiwany PBS, a preparat jest barwiony hemem przez około 1 minutę. Roztwór hemalu jest wypłukiwany PBS, preparat jest osadzany i badany.
Roztwory substratów:
Aminoetylo-karbazol: Rozpuścić 2 mg 3-amino-9-etylokarbazolu w 1,2 ml dimetylosulfotlenku i dodać 28,8 ml Tris-HCI, 0,05 M; pH 7,3; i 20 μL 3% H 2 O 2 , (w/v). Przygotowywać roztwór świeżo każdego dnia. Diaminobenzydyna: Rozpuścić 25 mg 3,3′-diaminobenzydyny w 50 ml Tris-HCI, 0,05 M; pH 7,3; i dodać 40 μl 3% H2O2 , (w/v). Przygotowywać roztwór świeżo każdego dnia. Uwaga: Roztwory przeciwciał muszą być całkowicie wolne od osadu! W razie potrzeby odwirować roztwory z dużą prędkością przed użyciem.
Charakterystyka guza
Do charakterystyki guza zalecany jest dwuetapowy test eksperymentalny:
1. Określenie pochodzenia tkankowego guza za pomocą anty-cytokeratyny pan, anty-desminy, anty-kwasowego białka fibrylarnego gleju, anty-neurofilamentu i anty-wimentyny.
2. Charakterystyka guza nabłonkowego za pomocą przeciwciał przeciwko klasom cytokeratyn, które są charakterystyczne dla różnych tkanek, np. anty-cytokeratyna nr 7, anty-cytokeratyna nr 18. Materiał próbki: Normalna tkanka, tkanka guza po zabiegu chirurgicznym lub do 24 godzin po autopsji, zamrożone skrawki lub utrwalone formaldehydem skrawki zatopione w parafinie,
Metoda wykrywania
Analiza immunohistochemiczna (wykrywanie pierwotnego przeciwciała, np. za pomocą anty-mysiej Ig-peroksydazy lub anty-mysiej Ig-FITC).
Procedura:
Idealne zamrożone skrawki uzyskuje się z próbek tkanek zamrożonych szokowo. Zamrożone skrawki są suszone na powietrzu, a następnie utrwalane acetonem przez 5-10 minut w temperaturze od -15 do -25°C. Nadmiar acetonu odparowuje się w temperaturze 15-25°C. Można również użyć materiału utrwalonego w alkoholu.
Preparaty z cytowirówki pojedynczych komórek lub rozmazów komórkowych są również utrwalane w acetonie. Preparaty te nie powinny być jednak suszone na powietrzu, nadmiar acetonu jest usuwany przez krótkie płukanie w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS). Dalsze postępowanie jest następujące:
- Nałożyć na preparat 10 - 20 μL roztworu przeciwciał i inkubować w wilgotnej komorze przez 30 - 60 min w temperaturze 15-25°C.
- Zanurzyć szkiełko na krótko w PBS, a następnie płukać w PBS 3 razy po 3 minuty (za każdym razem używając świeżej kąpieli PBS).
- Wytrzeć brzegi preparatu do sucha, nałożyć na preparat 10-20 μL roztworu anty-mysiej lg-FITC lub anty-mysiej Ig-peroksydazy i pozostawić do inkubacji w wilgotnej komorze przez 30 min w temperaturze 15-25°C.
Przepłukać szkiełko w PBS, jak opisano powyżej.
Nie wolno dopuścić do wyschnięcia preparatu podczas któregokolwiek z etapów. Jeśli stosuje się technikę immunofluorescencji pośredniej, preparat należy pokryć odpowiednim podłożem do zatapiania (np. Mowiol, Hoechst) i zbadać pod mikroskopem fluorescencyjnym. Jeśli jako przeciwciało drugorzędowe stosuje się koniugat POD, preparat należy pokryć roztworem substratu (patrz poniżej) i inkubować w temperaturze 15-25°C, aż pojawi się wyraźnie widoczny czerwono-brązowy kolor. Kontrola negatywna (np. tylko znakowane przeciwciało drugorzędowe) powinna pozostać niezmieniona w kolorze podczas tego okresu inkubacji.
Następnie substrat jest wypłukiwany PBS, a preparat jest barwiony hemem przez około 1 minutę. Roztwór hemalu jest wypłukiwany PBS, preparat jest osadzany i badany.
Roztwory substratów:
Aminoetylo-karbazol: Rozpuścić 2 mg 3-amino-9-etylokarbazolu w 1,2 ml dimetylosulfotlenku i dodać 28,8 ml Tris-HCI, 0,05 M; pH 7,3; i 20 μL 3% H 2 O 2 , (w/v). Przygotowywać roztwór świeżo każdego dnia. Diaminobenzydyna: Rozpuścić 25 mg 3,3′-diaminobenzydyny w 50 ml Tris-HCI, 0,05 M; pH 7,3; i dodać 40 μl 3% H2O2 , (w/v). Przygotowywać roztwór świeżo każdego dnia. Uwaga: Roztwory przeciwciał muszą być całkowicie wolne od osadu! W razie potrzeby odwirować roztwory z dużą prędkością przed użyciem.
To przeciwciało przeciwko cytokeratynie Pan, klon Lu5, zostało zatwierdzone do stosowania w IH do wykrywania cytokeratyny Pan.
Działania biochem./fizjol.
Przeciwciało reaguje z epitopem, który jest wspólny dla wszystkich cytokeratyn, odpowiednio z białkiem związanym z cytokeratynami. Antygen rozpoznawany przez anty-cytokeratynę pan jest obecny we wszystkich typach nabłonków. Przeciwciało reaguje z komórkami nabłonkowymi i mezotelialnymi. Wyjątek: Komórki wydzielnicze nie są barwione, a na przykład komórki acinus wykazują jedynie słabe barwienie. Przeciwciało nie reaguje z tkanką łączną, naczyniami krwionośnymi lub limfatycznymi, mięśniami gładkimi lub szkieletowymi. Wyjątek: Gdy stosowane są wyższe stężenia przeciwciał, słabo dodatnie reakcje można zaobserwować w przypadku mięśni gładkich myometrium, prostaty, a także błony śluzowej żołądka. Przeciwciała mogą być stosowane do diagnostyki różnicowej guzów nabłonkowych, odróżniania od guzów mezenchymalnych, guzów nerwowych, a także chłoniaków wielkokomórkowych. Anty-cytokeratyna pan barwi wszystkie guzy nabłonkowe (guzy pierwotne oraz przerzuty). Wyjątek: Tylko częściowo dodatnie barwienie obserwuje się w przypadku guzów z komórek theca, guzów z komórek ziarnistych, guzów kory nadnerczy. W guzach mieszanych (np. rakowiak, grasiczak, gruczolakorak) wybarwione są tylko obszary nabłonkowe. Guzy pochodzenia nienabłonkowego nie reagują z przeciwciałem. Wyjątek: Przy wysokich stężeniach przeciwciał obserwuje się słabe barwienie mięśniakomięsaka gładkokomórkowego macicy.
Postać fizyczna
Format: Oczyszczony
Płyn. Bufor = 0,02 M bufor fosforanowy, 0,25 M NaCl z 0,1% azydkiem sodu.
Uwaga dotycząca przygotowania
Liofilizowane przeciwciało jest stabilne podczas przechowywania w temperaturze 2-8°C. Odtworzony roztwór przeciwciała jest stabilny w temperaturze 2-8°C przez trzy miesiące. Roztwór można przechowywać w podwielokrotnościach w temperaturze od -15 do -25°C przez 12 miesięcy. Unikać powtarzania cykli zamrażania/rozmrażania.
Inne uwagi
Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Nie możesz znaleźć właściwego produktu?
Wypróbuj nasz Narzędzie selektora produktów.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Bhairavi Bhatia et al.
Experimental eye research, 93(6), 852-861 (2011-10-13)
Much controversy has arisen on the nature and sources of stem cells in the adult human retina. Whilst ciliary epithelium has been thought to constitute a source of neural stem cells, a population of Müller glia in the neural retina
Z Zhang et al.
Neuroscience, 174, 10-25 (2010-12-01)
In adult cortices, the ratio of excitatory and inhibitory conductances (E/I ratio) is presumably balanced across a wide range of stimulus conditions. However, it is unknown how the E/I ratio is postnatally regulated, when the strength of synapses are rapidly
Active Filters
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej