LIBTM-RO

Liberase^™ TM Research Grade

medium Thermolysin concentration

• NACRES: NA.28
• UNSPSC Code: 12352204

Eigenschaften

• form: lyophilized
• packaging: pkg of 10 mg (05401119001 [2 x 5 mg]), pkg of 100 mg (05401127001 [2 x 50 mg])
• manufacturer/tradename: Roche
• parameter: 35-37 °C optimum reaction temp.
• technique(s): single cell analysis: suitable, tissue processing: suitable
• color: white
• optimum pH: 7.4
• solubility: water: soluble
• suitability: suitable for flow cytometry
• application(s): life science and biopharma; sample preparation
• foreign activity: Endotoxin 1 EU/mg
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C
• Quality Level: 100

Beschreibung

Application

Liberase^™(Thermolysin Medium) Research Grade wird für die Auftrennung vieler Gewebetypen in Anwendungen eingesetzt, in denen die hohe Reinheit der Enzymmischung für eine hohe Ausbeute und Lebensfähigkeit der Zellen notwendig ist.[1][2][3] Der Gehalt an bakteriellen Nebenprodukten wie Endotoxinen ist bis auf mehrere Tausendstel reduziert.

Features and Benefits

• Maximieren von Ausbeute und Lebensfähigkeit der isolierten Zellen: mit einer Enzymmischung, die weniger Clostripain- und Trypsinaktivität aufweist und weniger Endotoxine enthält.
• Höhere spezifische Aktivität der Enzymmischung: als Ergebnis der höheren Reinheit der Kollagenase I + II (durch HPLC-Analyse bestimmt)
• Erhöhte experimentelle Reproduzierbarkeit: durch größere Übereinstimmung zwischen den Chargen.
• Erhöhte Sicherheit: mit einem Enzym, das frei von Rohmaterialien aus Säugetier- oder Vogelgewebe ist.

General description

Liberase TM Research Grade enthält hochreine Kollagenase I und Kollagenase II. Diese beiden Kollagenase-Isoformen sind in einem genauen Verhältnis aufeinander abgestimmt, und zusammen mit einer mittleren Konzentration an Thermolysin, eine nicht klostridiale, neutrale Protease.

Other Notes

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Preparation Note

Stabilisatoren: Calcium
-Arbeitskonzentration für Liberase-Enzyme in Forschungsqualität:

Liberase-Enzyme verfügen über eine signifikant höhere spezifische Aktivität als herkömmliche Kollagenasen. Dies bedeutet, dass die Arbeitskonzentration gereinigter Liberase-Enzyme in Forschungsqualität, ausgedrückt in mg/ml, niedriger ist als die herkömmlicher Kollagenase.
Wenn die Anwendung nicht in dieser Liste enthalten ist, verwenden Sie zuerst Liberase TM in Forschungsqualität mit einer Konzentration von 0,08–0,28 Wünsch Einheiten/ml. Das Ziel ist die Bestimmung der besten Anfangskonzentration von Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität. Dies ist der Ausgangspunkt. Die endgültige Konzentration kann in Abhängigkeit von Verfahrens- und Chargenunterschieden bei herkömmlicher Kollagenase variieren.

Kollagenase-Arbeitskonzentration

Multiplizieren Sie Ihre vorherige Kollagenase-Arbeitskonzentration (mg/ml) mit ihrer spezifischen Aktivität (Wünsch-Einheiten/mg, [wie oben bestimmt]), um die Wünsch-Einheiten/ml zu erhalten. Zur Bestimmung des erforderlichen Volumens der Liberase-Enzymmischung in Forschungsqualität multiplizieren Sie zuerst Ihre Kollagenase-Arbeitskonzentration (in Wünsch-Einheiten/ml) mit dem Gesamtvolumen Ihrer Enzym-Arbeitslösung, um die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase zu ermitteln (Wünsch-Einheiten). Teilen Sie dann die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase durch die Stammkonzentration der Liberase in Forschungsqualität (“Rekonstituierung und Lagerung”). Das Ergebnis gibt an, wie viele Milliliter Stammlösung der Liberase-Enzymmischung in Forschungsqualität für Ihre Enzym-Arbeitslösung verwendet werden müssen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Nicht verwendete Stammlösung in Einweg-Aliquoten bei -15 bis -25 °C lagern.

Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.

Behälter dicht verschlossen an einem trockenen und gut belüfteten Ort aufbewahren.

Rekonstituieren Sie das lyophilisierte Enzym mit sterilem Wasser zur Injektion oder mit Puffer zur Gewebedissoziation. Geben Sie kein Serum oder andere Komponenten wie Albumin oder Proteaseinhibitoren zu dem Dissoziationspuffer hinzu. Die Enzymstabilität ist bei höheren Konzentrationen und wärmeren Temperaturen (4 °C) verringert. Vermeiden Sie die beiden vorgenannten Bedingungen.

Rekonstituieren Sie den gesamten Inhalt des Fläschchens. Das lyophilisierte Pulver darf nicht in Einzelportionen abgewogen und aufgeteilt werden. Wenn Feuchtigkeit in das Fläschchen gelangt, verringert sich dadurch die Enzymaktivität.

Bewahren Sie das Fläschchen während der Rehydrierung des lyophilisierten Enzyms auf Eis auf.

Das Fläschchen muss vorsichtig bei 2 bis 8 °C geschüttelt werden, bis sich das Enzym vollständig aufgelöst hat (max. 30 min).

Abhängig von der Art des Gewebedissoziationspuffers, der zum Auflösen der gereinigten Liberase Research Grade-Enzymmischungen verwendet wird, sind möglicherweise geringfügige Ausfällungen sichtbar, die sich in der verdünnten Arbeitslösung leicht auflösen und die Enzymaktivität nicht beeinflussen.

Entnehmen Sie ein Aliquot der Stammlösung, um die Arbeitslösung herzustellen.

Rekonstitutionsvolumen

2 ml (1 Fläschchen mit einer Packungsgröße von 5 mg-10 mg), 10 ml (1 Fläschchen mit einer Packungsgrößen von 50 mg–100 mg)

Collagenase Wünsch (Einheiten/ml)

13 (1 Fläschchen mit einer Packungsgröße von 5 mg-10 mg), ), 26 (1 Fläschchen mit einer Packungsgröße von 50 mg–100 mg)

Gesamtkonzentration Colagenase [mg/ml]

2,5 (1 Fläschchen mit einer Packungsgröße von 5 mg–10 mg), 5,0 (1 Fläschchen mit einer Packungsgröße von 50 mg–100 mg)

Legal Information

Liberase is a trademark of Roche

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H315 - H319 - H334 - H335
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash