The available probes include:
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit MINUS (Product number: DUO92005)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS (Product number: DUO92002)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS (Product number: DUO92004)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse PLUS (Product number: DUO92001)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Human MINUS (Product number: DUO92021)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Human PLUS (Product number: DUO92020)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Goat MINUS (Product number: DUO92006)
Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Goat PLUS (Product number: DUO92003)
DUO92014
Duolink® In-situ-Detektionsreagenzien Grün
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Duolink®
technique(s)
proximity ligation assay: suitable
fluorescence
λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)
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suitable for fluorescence
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−20°C
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Dieser Artikel | DUO92013 | DUO92007 | DUO92008 |
|---|---|---|---|
| technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable |
| suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence |
| fluorescence λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38) | fluorescence λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50) | fluorescence λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20) | fluorescence λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31) |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
| shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice |
| Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
Application
Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.[1][2][3][4]
Biochem/physiol Actions
Grüne Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oftmals mit FITC-Filter verwendet.
Features and Benefits
- Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
- Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
- Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplifikation)
- Relative Quantifizierung möglich
- Keine Spezialgeräte erforderlich
- Schneller und einfacher als FRET
- Höhere Präzision als co-IP
- Publikationsreife Ergebnisse
General description
Die Duolink® In-situ-Detektionsreagenzien Grün enthalten alle notwendigen Duolink In-situ-Reagenzien zur Amplifikation und Detektion gebundener PLA® Sonden. Die Detektionssonden enthalten ein Fluorophor (lex = 495 nm und lem = 527 nm), das mit dem gleichen Filter wie Cy®2 oder FITC visualisiert werden kann. Experimente mit den Duolink In-situ-Reagenzien ermöglichen Nachweis und Visualisierung von Protein-Interaktionen, Proteinexpressionswerten und posttranslationalen Modifikationen auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.
Other Notes
- 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
- 1x Ligase (1 Einheit/μL)
- 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)
- 5x Amplification Grün - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling Circle Amplification (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase. Es enthält außerdem Oligonukleotid-Sonden, die mit einem Fluorophor markiert sind, das an das RCA-Produkt hybridisiert.
Nicht im Detektionskit enthalten:
Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel
Folgen Sie dem Duolink® In-situ-Fluoreszenzprotokoll zur Anwendung dieses Produkts. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls erhältlich.
Besuchen Sie unser Duolink® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink® Versuchen, Anwendungen und Fehlerbehebungen und anderes finden können.
Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink® Projekte
Komplette Duolink® Produktliste
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Komplette Duolink® Produktliste
Preparation Note
Komponenten bei -20 °C aufbewahren. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.
Zur Durchführung eines kompletten Duolink® PLA In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Nachweisreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.
Legal Information
Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Lagerklasse
10 - Combustible liquids
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Protein Phosphatase 1c Associated with the Cardiac Sodium Calcium Exchanger1 Regulates its Activity by Dephosphorylating Serine 68 Phosphorylated Phospholemman.
Hafver T L, et al.
The Journal of Biological Chemistry, M115-M115 (2015)
Xiaofan Li et al.
PLoS pathogens, 13(3), e1006249-e1006249 (2017-03-02)
Trials to reintroduce chloroquine into regions of Africa where P. falciparum has regained susceptibility to chloroquine are underway. However, there are long-standing concerns about whether chloroquine increases lytic-replication of Epstein-Barr virus (EBV), thereby contributing to the development of endemic Burkitt
Xiaofan Li et al.
Journal of virology, 93(17) (2019-06-14)
Herpesviruses are ubiquitous, and infection by some, like Epstein-Barr virus (EBV), is nearly universal. To persist, EBV must periodically switch from a latent to a replicative/lytic phase. This productive phase is responsible for most herpesvirus-associated diseases. EBV encodes a latency-to-lytic
Travis Rush et al.
Neurobiology of disease, 134, 104668-104668 (2019-11-08)
The microtubule-associated protein Tau is strongly implicated in Alzheimer's disease (AD) and aggregates into neurofibrillary tangles in AD. Genetic reduction of Tau is protective in several animal models of AD and cell culture models of amyloid-β (Aβ) toxicity, making it
M Aubele et al.
British journal of cancer, 103(5), 663-667 (2010-08-12)
Protein tyrosine kinase 6 (PTK6; breast tumour kinase) is overexpressed in up to 86% of the invasive breast cancers, and its association with the oncoprotein human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) was shown in vitro by co-precipitation. Furthermore, expression
Artikel
Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.
Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
Protokolle
This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.
This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection
In diesem Protokoll wird beschrieben, wie der Immunfluoreszenznachweis von Proteinen in Zellen und Gewebe durchgeführt wird.
Verwandter Inhalt
View an automated protocol for Duolink® assays on the AAW™ automated assay workstation and see results comparing manual vs automated runs.
Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay
Instructions
Application Note
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What are the species of the positive and negative probes?
1 Antwort-
Hilfreich?
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Is there a variation in the intensity of the fluorophores recommended in the flow kits, where one may appear brighter compared to the others?
1 Antwort-
Duolink Fluorophores vary in intensity. Violet is the strongest with low background. Far red is equally strong but may have higher diffuse background in certain cell types. Refer to attached pictures for visual comparison. When doing multicolor flow cytometry, choose fluorophores with minimal spectral overlap. Reserve brightest fluorophore for lowest expressing signal.
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