DUO92014

Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien Grün

• NACRES: NA.32
• UNSPSC Code: 12352200

Eigenschaften

• product line: Duolink^®
• Quality Level: 200
• technique(s): proximity ligation assay: suitable
• fluorescence: λ_ex 495 nm; λ_em 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)
• suitability: suitable for fluorescence
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Die Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien Grün enthalten alle notwendigen Duolink In-situ-Reagenzien zur Amplifikation und Detektion gebundener PLA^® Sonden. Die Detektionssonden enthalten ein Fluorophor (lex = 495 nm und lem = 527 nm), das mit dem gleichen Filter wie Cy^®2 oder FITC visualisiert werden kann. Experimente mit den Duolink In-situ-Reagenzien ermöglichen Nachweis und Visualisierung von Protein-Interaktionen, Proteinexpressionswerten und posttranslationalen Modifikationen auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Application

Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien werden verwendet beim Proximity Ligation Assay (PLA) von:

• Vasopressin- und Gonadotropin-Releasing-Hormon (GnRH) von tiefgefrorenen Rattenhirnschnitten[1]
• humanen embryonalen Nierenzellen 293 (HEK)[2]
• Hypophysegeweben[3]

Der Duolink^®Proximity Ligation Assay (PLA^®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.[4][5][6]

Biochem/physiol Actions

Grüne Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oftmals mit FITC-Filter verwendet.

Features and Benefits

• Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
• Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
• Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplifikation)
• Relative Quantifizierung möglich
• Keine Spezialgeräte erforderlich
• Schneller und einfacher als FRET
• Höhere Präzision als co-IP
• Publikationsreife Ergebnisse

Preparation Note

Komponenten bei -20 °C aufbewahren. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink^® PLA In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Nachweisreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink^® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.

Other Notes

• 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
• 1x Ligase (1 Einheit/μL)
• 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)
• 5x Amplification Grün - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling Circle Amplification (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase. Es enthält außerdem Oligonukleotid-Sonden, die mit einem Fluorophor markiert sind, das an das RCA-Produkt hybridisiert.

Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Folgen Sie dem Duolink^® In-situ-Fluoreszenzprotokoll zur Anwendung dieses Produkts. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls erhältlich.

Besuchen Sie unser Duolink^® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink^® Versuchen, Anwendungen und Fehlerbehebungen und anderes finden können.
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Komplette Duolink^® Produktliste

Legal Information

Cy is a registered trademark of Cytiva

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• signalword: Danger
• hcodes: H334,H411,EUH430
• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 3
• pictograms: GHS08,GHS09
• pcodes: P201 - P202 - P273 - P391 - P405 - P501
• Hazard Classifications: Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Resp. Sens. 1