Merck

mRNA疫苗工艺生产

mRNA疫苗工艺链

mRNA疫苗工艺链

将mRNA递送到细胞的细胞质基质中可诱导靶蛋白的产生,从而触发可发挥疫苗作用的免疫反应。新冠病毒疫苗空前的开发速度和功效,充分证明了mRNA技术的强大和广阔前景。

mRNA疫苗的开发和生产相对简单、可扩大化且极为快速。mRNA是通过酶促过程而在体外合成产生的,无需去除细胞或宿主细胞蛋白。这种简化的生产工艺使得GMP设施能够在很短时间内转型生产新的蛋白质靶标,仅需对工艺和配方进行极其微小的改动。


相关资源


优化质粒DNA生产

鉴于DNA模板在mRNA疫苗生产中的核心作用,其设计和纯度是优化mRNA产品的重要因素。现可采用多种不同技术。传统方法基于在细菌细胞内扩增的质粒DNA,且必须设计后续的纯化步骤来生成浓缩的纯环状pDNA,然后将其线性化。我们基于PCR的DNA模板制备技术与之截然不同,并已显现出相对其他mRNA制造技术的优势。

最大限度提高mRNA回收率

mRNA的纯度是产量和效率的关键决定因素。去除杂质可降低先天免疫反应并显著提高报告蛋白的表达水平。在体外转录之后,必须去除产品和工艺杂质,包括最终的内毒素、免疫原性双链RNA(dsRNA)、残留的DNA模板、RNA聚合酶、RNA-DNA杂交体、二级RNA结构(发夹污染物)、元素杂质。这些杂质会引起强烈的炎症反应和副作用,需在产品放行前严格管控。

保证mRNA的纯化效果

mRNA纯化可有多种选择,包括切向流过滤(TFF)、反相离子对、阴离子交换(AEX)、疏水相互作用色谱(HIC)和使用poly(dT)捕获的亲和层析。在层析步骤之后,进行最终浓缩和渗滤以最大程度提高纯度,然后将mRNA转移到适当的缓冲液中进行后续需配制或储存。

优化疫苗的递送

纯化mRNA必须配制进递送颗粒中。脂质纳米颗粒(LNP)常用于此目的,并可防止mRNA降解。为此,必须根据所需的递送路径来选择脂质,以最大限度改善功效和生物体内分布。选择脂质时需要考虑的其他因素包括类型、来源和质量。







登录以继续。

如要继续阅读,请登录或创建帐户。

暂无帐户?