Merck

RAP-RO

Roche

rAPid アルカリホスファターゼ

1 units/μg protein, optimum reaction temp. 37 °C

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別名:
アルカリホスファターゼ、DNA断片のクローン
Enzyme Commission number:

由来生物

bovine intestine

品質水準

リコンビナント

expressed in Pichia pastoris

形状

liquid

比活性

1 units/μg protein

分子量

monomer 56  kDa by SDS-PAGE

包装

pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl])
pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])

メーカー/製品名

Roche

濃度

<0.1 % (w/w)

パラメーター

37 °C optimum reaction temp.

テクニック

molecular cloning: suitable

colorless

pH

7.6-8.5 (68 °F)

溶解性

water: miscible

適合性

suitable for molecular biology

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

アプリケーション

life science and biopharma

その他の活性

Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C)
unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)

保管温度

−20°C

遺伝子情報

bovine ... ALPI(280993)

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当該品目
API-ROAPMB-ROA2237
rAPid アルカリホスファターゼ 1&#160;units/&#956;g protein, optimum reaction temp. 37 °C

RAP-RO

rAPid アルカリホスファターゼ

アルカリホスファターゼ solution, from bovine (calf) intestine, 2&#160;units/&#956;g protein, optimum pH 7.5-9.5

APMB-RO

アルカリホスファターゼ

biological source

bovine intestine

biological source

bovine (calf) intestine

biological source

bovine (calf) intestine

biological source

-

specific activity

1 units/μg protein

specific activity

~2000 units/mg protein (At 37 °C with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and diethanolamine as the buffer (400 U/mg at 25 °C with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and glycine as the buffer))

specific activity

2 units/μg protein

specific activity

-

Gene Information

bovine ... ALPI(280993)

Gene Information

-

Gene Information

-

Gene Information

-

recombinant

expressed in Pichia pastoris

recombinant

-

recombinant

-

recombinant

expressed in proprietary host

form

liquid

form

suspension

form

solution

form

buffered aqueous glycerol solution

詳細

rAPidアルカリホスファターゼは、ウシ膵臓から分離されたアルカリホスファターゼであり、酵母菌のピキア・パストリスと表記される56 kDの再結合酵素として供給されます。再結合フォームにより、耐久性と安全性が保証されます。rAPidアルカリホスファターゼは、5′リン酸塩のDNAおよびRNA、ヌクレオチド、およびたんぱく質からの脱リン酸化に触媒作用を及ぼします。アルカリホスフォターゼ処理によって、リガーゼに必要な5′-ホスホリル終端の除去によりDNA断片の自己核酸連結が防止されます。この特徴は、ベクトルバックグラウンドを減少させるためのクローン戦略においてもっとも重要です。ウシ腸ホスファターゼと異なり、rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間の熱処理により急速に、完全に、かつ不可逆的に不活性化されます。 したがって、これはShrimp Alkaline Phosphataseの代替品として優れています。さらに、本酵素は制限酵素バッファー内で活性です。したがって、制限酵素分解、脱リン酸化、酵素不活性化、核酸連結、または5′-終端ラベリングは、精製工程なしで実行可能です。

特異性

アルカリホスファターゼは、第一級および第二級アルコール、サッカライド、環状アルコール、フェノール、アミン等の多くのホスファターゼエステルの加水分解に触媒作用を及ぼします。ホスホジエステラーゼは反応しません。酵素は、無機ピロホスフェイトを加水分解します。酵素の運動特性は、酵素の純度、分析中の酵素の濃度、緩衝剤、pH等の多くの因子に依存します。
熱による不活性化:RAPidアルカリホスファターゼは75°Cで2分間の保温により不活性化されます。

アプリケーション

  • 以下を含む多くのアプリケーションでRAPidアルカリホスファターゼが使用できます。核酸からの5′-ホスホリルグループの除去。
  • 5′-終端ラベリング用のテンプレートの準備。
  • dNTPsの除去によるPCR製品の洗浄。
  • たんぱく質の脱リン酸化。
注記:rAPidアルカリホスフォターゼは、+75 °Cで2分間加熱されると急速に不活性化します。制限および脱リン酸化後には、付加的な精製工程は不要です。脱リン酸化されたDNAは、核酸連結反応で直接的に使用可能です。
注記: rAPidアルカリホスフォターゼはまた、迅速で効率的な脱リン酸化および、粘着性またはブラント端のDNA断片の核酸連結を可能にする、 Rapid DNA Dephos &核酸連結キットにも含まれます。この便利なキットによって、ブラントで粘着性の5′-突出端の脱リン酸化が+37°C で10分間以内に実行され、核酸連結は +15–25°Cでちょうど5分間で完了します。

特徴および利点

  • 汚染リスクの除去:組換体発現、および高信頼性かつ高感度の品質管理試験により、高純度が保証されます。
  • 現在使用中のホスファターゼを安価なソリューションに交換しましょう: rAPidアルカリホスファターゼは、Shrimp Alkaline Phosphatase またはBovine Alkaline Phosphataseと同等の働きをします。
  • 動物起因の病気の除去:ピキア・パストリスにおける発現により、耐久性および安全性が保証されます。
  • 急速な熱不活性化による利点:rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間加熱するだけで不活性化されます。
  • 一貫した結果を得ること:rAPidアルカリホスファターゼは、他のアルカリホスファターゼと比べて、保管中の優れた安定性を有します。

包装

一つのキットは二つの部品を有します。

品質

rAPidアルカリホスファターゼの全ロットは、最新の品質管理手順に基づいて、デオキシリボヌクレアーゼの不在およびニッキング活性について試験されます。

単位の定義

RAPidアルカリホスファターゼの一単位は、分析条件下において+37°Cで1分間、1モルの4-ニトロフェニルホスファターゼを加水分解する酵素活性です。

体積活性:1 U/μl

その他情報

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

キットの構成要素のみ

製品番号
詳細

  • rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated

  • rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl

保管分類コード

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

does not flash

引火点(℃)

does not flash


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T1503
製品番号
-
25G
容量/数量

その他の例:

705578-5MG-PW

PL860-CGA/SHF-1EA

MMYOMAG-74K-13

1000309185

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