OGS37
PSF-T7 - T7 プロモータープラスミド
plasmid vector for molecular cloning
別名:
SnapFastベクター, クローニングベクター, プラスミド, プラスミドベクター, ベクター, 分子クローニングベクター, 発現ベクター
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この商品について
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: T7
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
form
buffered aqueous solution
mol wt
size 3862 bp
technique(s)
molecular cloning: suitable
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
promoter
Promoter name: T7
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
reporter gene
none
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
PSF-T7-T7プロモータープラスミドは、T7バクテリオファージポリメラーゼを使用したRNAの転写を可能にします。In vitro転写キットを使用している場合、このベクターから生成されたRNAは保護されておらずポリアデニル化されていないため、哺乳類細胞での発現には適していませんが、これらのmRNA機能を追加するキットがいくつかあります。PSF-T7-T7プロモーターは、T7ポリメラーゼを含む細胞株における誘導性遺伝子発現にも使用できます。
ほぼ全てのSnapFastベクターには、転写終結を可能にするマルチクローニングサイトの下流にT7ターミネーターが含まれています。また、必要に応じ、ヘアピンT7ターミネーターを利用せず、遺伝子の3末端である制限部位でベクターを消化し、ポリメラーゼを流出させることもできます。ワクシニアウイルスを含まない哺乳類T7システムで遺伝子を発現させる場合、生成されるRNAに5末端の保護がないため、遺伝子の上流にIRESが必要になります。
プロモーター発現レベル：
ほぼ全てのSnapFastベクターには、転写終結を可能にするマルチクローニングサイトの下流にT7ターミネーターが含まれています。また、必要に応じ、ヘアピンT7ターミネーターを利用せず、遺伝子の3末端である制限部位でベクターを消化し、ポリメラーゼを流出させることもできます。ワクシニアウイルスを含まない哺乳類T7システムで遺伝子を発現させる場合、生成されるRNAに5末端の保護がないため、遺伝子の上流にIRESが必要になります。
プロモーター発現レベル：
Application
遺伝子クローニング：このプラスミドは、様々なクローニング技術と互換性があるように設計されています。マルチクローニングサイトには、クローニングに広く使用される様々な標準的な制限部位が含まれています。これらの部位を使用すると、DNAリガーゼを用いた標準的なクローニング方法により遺伝子を挿入できます。リガーゼ独立クローニング（LIC）Gibson Assembly InFusionHDまたはSeamless GeneArtなど他の方法も使用できます。全てのプラスミドが同じバックボーンに基づいているため、全てのカタログベクターへのクローニングに同じ方法を使用できます。
マルチクローニングサイトに関する注釈：MCS内にはいくつかの重要な部位があります。NcoI部位、XbaI部位、BsgIおよびBseRI部位が含まれます。NcoI部位には、コザックおよびシャインダルガルノリボソーム結合部位両方のすぐ下流に開始コドンが含まれています。この結果、開始コドンが当該位置に配置されると遺伝子の配置が最適となります。これらが不要であり遺伝子クローニングに下流部位を使用したい場合、プラスミドをKpnIで切断することによりNcoI部位を削除できます。
XbaI部位には停止コドンが含まれています。この停止コドンは、すぐ下流にあるBsgIおよびBseRI部位に対し特定の位置に配置します。BseRIまたはBsgIがプラスミドを切断すると、同一部位で切断された全てのペプチドタグプラスミドと対応するXbaI部位の停止コドンからTAオーバーハングが生成されます。BseRIおよびBsgI部位は非回文構造であり、結合部位から一定数の塩基を切り離します。
遺伝子をマルチクローニングサイトにクローニングする場合、MCSの同じ位置に開始コドンおよび停止コドンを常に配置します。遺伝子の開始および終了がNcoIおよびXbaIと一致しない場合、配列を最も近い外部部位に拡張しますが、開始コドンと停止コドンの位置は一致させます。
マルチクローニングサイトに関する注釈：MCS内にはいくつかの重要な部位があります。NcoI部位、XbaI部位、BsgIおよびBseRI部位が含まれます。NcoI部位には、コザックおよびシャインダルガルノリボソーム結合部位両方のすぐ下流に開始コドンが含まれています。この結果、開始コドンが当該位置に配置されると遺伝子の配置が最適となります。これらが不要であり遺伝子クローニングに下流部位を使用したい場合、プラスミドをKpnIで切断することによりNcoI部位を削除できます。
XbaI部位には停止コドンが含まれています。この停止コドンは、すぐ下流にあるBsgIおよびBseRI部位に対し特定の位置に配置します。BseRIまたはBsgIがプラスミドを切断すると、同一部位で切断された全てのペプチドタグプラスミドと対応するXbaI部位の停止コドンからTAオーバーハングが生成されます。BseRIおよびBsgI部位は非回文構造であり、結合部位から一定数の塩基を切り離します。
遺伝子をマルチクローニングサイトにクローニングする場合、MCSの同じ位置に開始コドンおよび停止コドンを常に配置します。遺伝子の開始および終了がNcoIおよびXbaIと一致しない場合、配列を最も近い外部部位に拡張しますが、開始コドンと停止コドンの位置は一致させます。
Analysis Note
本製品の分析証明書を参照するにはwww.oxgene.comにアクセスしてください。
Other Notes
この製品の配列情報については、製品ページをご覧ください。
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
引火点 (F)
Not applicable
引火点（°C）
Not applicable