04536282001

DNaza I rekombinowana

grade I, from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris

• Numer WE: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.28
• UNSPSC Code: 12352204
• Form: lyophilized
• Solubility: water: soluble
• Storage temp.: 2-8°C

Właściwości

• biological source: bovine pancreas
• recombinant: expressed in Pichia pastoris
• form: lyophilized
• specific activity: (>10,000 U/bottle according to Kunitz (+25°C; DNA as substrate).)
• mol wt: 39 kDa
• packaging: pkg of 2 × 10,000 U
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: ≥70-90%
• technique(s): protein extraction: suitable
• color: white to light yellow
• solubility: water: soluble
• suitability: suitable for molecular biology
• NCBI accession no.: NM_174534
• UniProt accession no.: P00639
• application(s): sample preparation
• foreign activity: Proteases, none detected, RNase, none detected
• storage temp.: 2-8°C
• Gene Information: bovine ... DNASE1(282217)

Opis

General description

Właściwości: Endonukleaza specyficzna dla podwójnej nici, która wymaga kationów dwuwartościowych dla maksymalnej aktywności.
Aktywność: 10 000U/butelkę według Kunitza (+25°C; DNA jako substrat).
Definicja jednostki: Jedna jednostka to aktywność enzymu, która powoduje wzrost absorbancji o 0,001 na minutę w warunkach testu.

Degraduje jedno- i dwuniciowe DNA; aktywność dwuniciowa wymaga kationów dwuwartościowych dla maksymalnej aktywności.

Application

• DNaza I, rekombinowana, stopień I jest stosowana do:Eliminacji DNA podczas procedur izolacji białek
• Analiza struktury chromatyny
• Eliminacji DNA podczas przygotowywania próbek

Features and Benefits

Zawartość
Liofilizat

Preparation Note

Aktywator: Enzym wymaga dwuwartościowych kationów dla maksymalnej aktywności. Specyficzność reakcji zależy od rodzaju użytego kationu. W obecności ^Mg2+ DNaza I powoduje jednoniciowe nacięcia w dsDNA, podczas gdy w obecności ^Mn2+ enzym wytwarza dwuniciowe przerwy.
Warunki przechowywania (roztwór roboczy): Długotrwałe przechowywanie rozpuszczonego enzymu

Rozpuszczalnikiem ogólnie zalecanym dla DNazy I jest woda. Po odtworzeniu DNazy I w wodzie, roztwór może być przechowywany przez 2 dni w temperaturze od 2 do 8 °C i przez 1 miesiąc w temperaturze od -15 do -20 °C. Aby uzyskać najlepsze wyniki, należy przygotować odpowiednie porcje i unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania. Jednak w celu długotrwałego przechowywania należy ostrożnie rozpuścić DNazę I w jednym z buforów wymienionych poniżej. W buforze 1 enzym będzie stabilny przez kilka tygodni. Enzym będzie stabilny przez co najmniej 18 miesięcy, jeśli zostanie rozpuszczony w buforze 2, 3 lub 4 i przechowywany w zalecanych temperaturach.

Uwaga: Nie worteksować enzymu podczas rozpuszczania!
Bufor 1: 20 mM Tris-HCl, 20 mM _MgCl2, 5 mM _CaCl2, 0,1 mM ditioerytrytolu, 0.1 mM EDTA, 50% (v/v) glicerol, pH 8. Przechowywać ten roztwór w temperaturze od -15 do -25 °C; w tej temperaturze nie zamarza i zachowuje stabilność przez kilka tygodni.
Bufor 2: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM ditioerytrytol, 100 μg/ml BSA, 50% glicerol (v/v), pH 7,6. Roztwór należy przechowywać w temperaturze od -15 do -25 °C przez okres do 18 miesięcy; w tej temperaturze nie zamarza.
Bufor 3: 20 mM Tris-HCl, 1 mM _MgCl2, 50% (w/v) glicerol, pH 7,5. Roztwór ten należy przechowywać w temperaturze od -15 do -25°C przez okres do 18 miesięcy; w tej temperaturze nie zamarza.
Bufor 4: 20 mM Tris-HCl, 1 mM _MgCl2, pH 7,5. Odmierzyć odpowiednie ilości(np. 10 μl), szybko zamrozić w suchym lodzie i przechowywać w temperaturze -60°C lub niższej przez okres do 18 miesięcy. Rozmrażać tylko ilość potrzebną do każdego eksperymentu. Nie zamrażać ponownie. Wyrzucić resztki rozmrożonego roztworu.

Szczelnie zamknięte. Suche.

Other Notes

Jedna jednostka, według Kunitza, to aktywność enzymu, która w warunkach testu powoduje wzrost absorbancji przy 260 nm o 0,001/minutę w 1 ml. Aktywność objętościową określa się w 0,1 M octanie sodu, 5 mM _MgSO4, pH 5,0.
Mieszanina testowa: DNA grasicy cielęcej (100 μg) inkubuje się z 20 do 50 U DNazy I w temperaturze +25 °C.
Wzrost absorbancji mierzy się przy 260 nm.

Uwaga: Warunki te są stosowane do oznaczania aktywności, zgodnie z Kunitz, ponieważ test Kunitz zapewnia wysoką powtarzalność i czułość. W przypadku stosowania tego enzymu do normalnych celów eksperymentalnych firma Roche zaleca stosowanie buforów inkubacyjnych odpowiednich dla danego zastosowania, np. wymienionych w standardowej literaturze (Sambrook i in., Curr. Prot. Mol. Biol. itp.).

Wyłącznie do badań naukowych. Nie do użytku w procedurach diagnostycznych.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Piktogramy: GHS08
• Słowo ostrzegawcze: Danger
• Ostrzeżenia: P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• Co się dzieje?: WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): does not flash
• Temperatura zapłonu (°C): does not flash
• Kody zagrożeń: H317,H334