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Merck

Tubgcp3 Is Required for Retinal Progenitor Cell Proliferation During Zebrafish Development.

Frontiers in molecular neuroscience (2019-06-11)
Guobao Li, Daqing Jin, Tao P Zhong
ZUSAMMENFASSUNG

The centrosomal protein γ-tubulin complex protein 3 (Tubgcp3/GCP3) is required for the assembly of γ-tubulin small complexes (γ-TuSCs) and γ-tubulin ring complexes (γ-TuRCs), which play critical roles in mitotic spindle formation during mitosis. However, its function in vertebrate embryonic development is unknown. Here, we generated the zebrafish tubgcp3 mutants using the CRISPR/Cas9 system and found that the tubgcp3 mutants exhibited the small eye phenotype. Tubgcp3 is required for the cell cycle progression of retinal progenitor cells (RPCs), and its depletion caused cell cycle arrest in the mitotic (M) phase. The M-phase arrested RPCs exhibited aberrant monopolar spindles and abnormal distributed centrioles and γ-tubulin. Moreover, these RPCs underwent apoptosis finally. Our study provides the in vivo model for the functional study of Tubgcp3 and sheds light on the roles of centrosomal γ-tubulin complexes in vertebrate development.

MATERIALIEN
Produktnummer
Marke
Produktbeschreibung

Roche
cOmplete, EDTA-freier Proteasehemmer-Cocktail, Tablets provided in EASYpacks
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Sigma-Aldrich
Monoklonaler Anti-α-Tubulin-Antikörper in Maus hergestellte Antikörper, clone DM1A, ascites fluid
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Sigma-Aldrich
Histochemisches Färbungskit für Seneszenzzellen, sufficient for 100 tests
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Sigma-Aldrich
Monoklonales Anti-Tubulin, acetyliert in Maus hergestellte Antikörper, clone 6-11B-1, ascites fluid
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Sigma-Aldrich
Anti-Phospho-Histon H3 (Ser10)-Antikörper, Mitosemarker, Upstate®, from rabbit
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Sigma-Aldrich
Methylzellulose, viscosity: 1,500 cP
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Sigma-Aldrich
Anti-γ-Tubulin-Antikörper, monoklonaler Antikörper der Maus in Maus hergestellte Antikörper, clone GTU-88, purified from hybridoma cell culture
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Sigma-Aldrich
Monoklonales Anti-PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) in Maus hergestellte Antikörper, clone PC 10, ascites fluid
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Roche
Anti-Bromdeoxyuridin, from mouse IgG1 (clone: BMC9318)
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Sigma-Aldrich
Anti-cMyc in Kaninchen hergestellte Antikörper, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution
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Sigma-Aldrich
Anti-Neurturin-Antikörper, serum, Chemicon®
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