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Merck

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LIBDH-RO

Roche

Liberase DH de grau para pesquisa

lyophilized, optimum pH 7.4, optimum reaction temp. 35-37 °C

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10 mg

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Sobre este item

NACRES:
NA.21
UNSPSC Code:
12352204
Biological source:
enzyme from Bacillus polymyxa (Protease), enzyme from Clostridium histolyticum (collagenase)

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biological source

enzyme from Bacillus polymyxa (Protease), enzyme from Clostridium histolyticum (collagenase)

description

high Dispase concentration

form

lyophilized

packaging

pkg of 10 mg (05401054001 [2 x 5 mg]), pkg of 100 mg (05401089001 [2 x 50 mg])

manufacturer/tradename

Roche

parameter

35-37 °C optimum reaction temp.

technique(s)

activity assay: suitable

color

white

optimum pH

7.4

solubility

water: soluble

application(s)

life science and biopharma

foreign activity

Endotoxin 3 EU/mg

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

General description

O método mais utilizado para procedimentos de descelularização, como dissociação de tecidos e coleta de células, baseia-se no uso de enzimas proteolíticas. As proteases rompem a matriz extracelular do tecido para permitir a liberação de células individuais ou a coleta de células cultivadas para transferência. O objetivo do isolamento de células é maximizar o rendimento das células dissociadas que são viáveis e funcionalmente ativas.
A tecnologia das enzimas liberase compreende métodos para purificar isoformas de colagenase de clostrídio para alta atividade específica, e para misturá-las com protease neutra de alta atividade específica em proporções ideais para dissociação eficaz de tecidos primários e células cultivadas. A Liberase DH de grau para pesquisa contém colagenase I e colagenase II altamente purificadas. Essas duas isoformas da colagenase são misturadas em uma proporção precisa em relação uma à outra, e com uma concentração alta de Dispase®, uma protease neutra não clostridial.
As enzimas liberase são projetadas para aumentar a qualidade e a reprodutibilidade da dissociação tecidual, e melhorar a viabilidade e funcionalidade de células isoladas. As misturas enzimáticas purificadas Liberase substituem a colagenase tradicional, que é um subproduto de fermentação bruto e variável de Clostridium histolyticum.

Application

A Liberase DH (alto teor de dispase) de grau para pesquisa é usada para a dissociação de diversos tipos de tecidos que requerem que a mistura enzimática seja de alta pureza para garantir altos rendimentos e viabilidade celular. Subprodutos bacterianos, como endotoxinas, são reduzidos em até vários milhares de vezes.
Ela foi usada para a digestão de fragmentos de tumor metastático. Foi usada para o desprendimento enzimático de colônias de células-tronco embrionárias humanas.

Features and Benefits

  • Maximize a viabilidade e o rendimento de células isoladas
com uma mistura enzimática que apresenta menos atividade de clostripaína e tripsina, além de um teor reduzido de endotoxinas.
  • Conte com uma maior atividade específica da mistura enzimática
como resultado de uma maior pureza de colagenase I + II (determinada por análise de HPLC).
  • Obtenha maior reprodutibilidade experimental
devido à maior consistência de um lote para outro.

Preparation Note

Estabilizantes: Cálcio
Concentração de trabalho: Concentração de trabalho da enzima de grau para pesquisa Liberase

As enzimas Liberase têm atividades específicas significativamente mais altas que as colagenases tradicionais. Isso significa que a concentração de trabalho das enzimas purificadas Liberase de grau para pesquisa, expressa em mg/ml, será mais baixa que a da colagenase tradicional.

Quando a aplicação estiver na lista de aplicações da Roche, no site www.collagenase.com, use a concentração recomendada de Liberase de grau para pesquisa para tal aplicação.

Quando a aplicação não estiver incluída na lista, use primeiro a Liberase TM de grau para pesquisa em uma concentração de 0,08-0,28 unidades de Wünsch/ml.

O objetivo é determinar a melhor concentração inicial das misturas enzimáticas Liberase de grau para pesquisa. Este é um ponto de partida, e a concentração final pode variar devido a diferenças em procedimentos e de um lote para outro de colagenase tradicional.

Concentração de trabalho da colagenase

Multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase anterior (mg/ml) pela sua atividade específica (unidades de Wünsch/mg, [conforme determinado acima]), para obter a concentração em unidades de Wünsch/ml. Para determinar quanto usar da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa, primeiro multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase (em unidades de Wünsch/ml) pelo volume total da sua solução enzimática de trabalho para obter a atividade de colagenase total necessária (unidades de Wünsch). Divida a a atividade da colagenase total necessária pela concentração-estoque de Liberase de grau para pesquisa (“Reconstituição e armazenamento”). Isso indica quantos mililitros de solução-estoque da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa devem ser usados na solução enzimática de trabalho.


Condições de armazenamento (solução de trabalho): Armazene a solução-estoque não utilizada em alíquotas de uso único em temperaturas de -15 °C a -25 °C. Para mais informações sobre a estabilidade do produto, visite o site da Enzima Liberase da Roche, em www.collagenase.com.

Observação: Evite o congelamento e descongelamento repetido.


Armazenar seco
Reconstitua a enzima liofilizada com água estéril de qualidade para injeção ou tampão de dissociação de tecidos. Não adicione soro ou outros componentes (p.ex., como albumina ou inibidores de proteases) ao tampão de dissociação. A estabilidade enzimática é reduzida em concentrações mais altas e temperaturas mais quentes (4 ºC). Evite ambas as condições acima.

Reconstitua o frasco todo. Não pese alíquotas individuais do liofilizado. A introdução de umidade nos frascos resulta em um declínio na atividade enzimática.

Coloque o frasco no gelo para reidratar a enzima liofilizada.

Agite gentilmente o frasco a 2 °C a 8 °C até que a enzima esteja completamente dissolvida (máx. de 30 min.).

Dependendo do tipo de tampão de dissociação de tecidos usado para dissolver as misturas enzimáticas purificadas Liberase de grau para pesquisa, pode-se observar pequenas precipitações, as quais se dissolvem prontamente na solução de trabalho diluída e não afetam a atividade enzimática.

Remova uma alíquota da solução-estoque para preparar a solução de trabalho.

Volume de reconstituição

2 ml (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)
10 ml (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Wünsch de colagenase (unidades/ml)

13 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)
26 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Concentração total de colagenase [mg/ml]

2,5 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)5
5,0 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Other Notes

  • Este produto destina-se apenas a pesquisas biológicas e ao uso in vitro. Esses produtos não devem ser utilizados para aplicações diagnósticas ou clínicas, como transplante de ilhotas humanas.
  • Todos os produtos Liberase de 1ª geração e os produtos Liberase Blendzyme (Liberase HI, CI, RI, PI, Liberase Blendzyme 1, 2, 3, 4) foram substituídos pela Liberase de 2ª geração de grau para pesquisa e portfólios de misturas enzimáticas Liberase de grau BPF. Para obter instruções sobre a transição de enzimas Liberase usadas anteriormente

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
Liberase is a trademark of Roche


pictograms

Health hazard

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2

Classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

does not flash



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