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Sobre este item
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biological source
enzyme from Bacillus polymyxa (Protease), enzyme from Clostridium histolyticum (collagenase)
description
high Dispase concentration
form
lyophilized
packaging
pkg of 10 mg (05401054001 [2 x 5 mg]), pkg of 100 mg (05401089001 [2 x 50 mg])
manufacturer/tradename
Roche
parameter
35-37 °C optimum reaction temp.
technique(s)
activity assay: suitable
color
white
optimum pH
7.4
solubility
water: soluble
application(s)
life science and biopharma
foreign activity
Endotoxin 3 EU/mg
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
A tecnologia das enzimas liberase compreende métodos para purificar isoformas de colagenase de clostrídio para alta atividade específica, e para misturá-las com protease neutra de alta atividade específica em proporções ideais para dissociação eficaz de tecidos primários e células cultivadas. A Liberase DH de grau para pesquisa contém colagenase I e colagenase II altamente purificadas. Essas duas isoformas da colagenase são misturadas em uma proporção precisa em relação uma à outra, e com uma concentração alta de Dispase®, uma protease neutra não clostridial.
As enzimas liberase são projetadas para aumentar a qualidade e a reprodutibilidade da dissociação tecidual, e melhorar a viabilidade e funcionalidade de células isoladas. As misturas enzimáticas purificadas Liberase substituem a colagenase tradicional, que é um subproduto de fermentação bruto e variável de Clostridium histolyticum.
Application
Ela foi usada para a digestão de fragmentos de tumor metastático. Foi usada para o desprendimento enzimático de colônias de células-tronco embrionárias humanas.
Features and Benefits
- Maximize a viabilidade e o rendimento de células isoladas
- Conte com uma maior atividade específica da mistura enzimática
- Obtenha maior reprodutibilidade experimental
Preparation Note
Concentração de trabalho: Concentração de trabalho da enzima de grau para pesquisa Liberase
As enzimas Liberase têm atividades específicas significativamente mais altas que as colagenases tradicionais. Isso significa que a concentração de trabalho das enzimas purificadas Liberase de grau para pesquisa, expressa em mg/ml, será mais baixa que a da colagenase tradicional.
Quando a aplicação estiver na lista de aplicações da Roche, no site www.collagenase.com, use a concentração recomendada de Liberase de grau para pesquisa para tal aplicação.
Quando a aplicação não estiver incluída na lista, use primeiro a Liberase TM de grau para pesquisa em uma concentração de 0,08-0,28 unidades de Wünsch/ml.
O objetivo é determinar a melhor concentração inicial das misturas enzimáticas Liberase de grau para pesquisa. Este é um ponto de partida, e a concentração final pode variar devido a diferenças em procedimentos e de um lote para outro de colagenase tradicional.
Concentração de trabalho da colagenase
Multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase anterior (mg/ml) pela sua atividade específica (unidades de Wünsch/mg, [conforme determinado acima]), para obter a concentração em unidades de Wünsch/ml. Para determinar quanto usar da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa, primeiro multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase (em unidades de Wünsch/ml) pelo volume total da sua solução enzimática de trabalho para obter a atividade de colagenase total necessária (unidades de Wünsch). Divida a a atividade da colagenase total necessária pela concentração-estoque de Liberase de grau para pesquisa (“Reconstituição e armazenamento”). Isso indica quantos mililitros de solução-estoque da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa devem ser usados na solução enzimática de trabalho.
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Armazene a solução-estoque não utilizada em alíquotas de uso único em temperaturas de -15 °C a -25 °C. Para mais informações sobre a estabilidade do produto, visite o site da Enzima Liberase da Roche, em www.collagenase.com.
Observação: Evite o congelamento e descongelamento repetido.
Reconstitua o frasco todo. Não pese alíquotas individuais do liofilizado. A introdução de umidade nos frascos resulta em um declínio na atividade enzimática.
Coloque o frasco no gelo para reidratar a enzima liofilizada.
Agite gentilmente o frasco a 2 °C a 8 °C até que a enzima esteja completamente dissolvida (máx. de 30 min.).
Dependendo do tipo de tampão de dissociação de tecidos usado para dissolver as misturas enzimáticas purificadas Liberase de grau para pesquisa, pode-se observar pequenas precipitações, as quais se dissolvem prontamente na solução de trabalho diluída e não afetam a atividade enzimática.
Remova uma alíquota da solução-estoque para preparar a solução de trabalho.
Volume de reconstituição
2 ml (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)
10 ml (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)
Wünsch de colagenase (unidades/ml)
13 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)
26 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)
Concentração total de colagenase [mg/ml]
2,5 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg)5
5,0 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)
Other Notes
- Este produto destina-se apenas a pesquisas biológicas e ao uso in vitro. Esses produtos não devem ser utilizados para aplicações diagnósticas ou clínicas, como transplante de ilhotas humanas.
- Todos os produtos Liberase de 1ª geração e os produtos Liberase Blendzyme (Liberase HI, CI, RI, PI, Liberase Blendzyme 1, 2, 3, 4) foram substituídos pela Liberase de 2ª geração de grau para pesquisa e portfólios de misturas enzimáticas Liberase de grau BPF. Para obter instruções sobre a transição de enzimas Liberase usadas anteriormente
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
Legal Information
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
Classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
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