Starting with total RNA or samples pre-enriched or microRNAs, the MystiCq® microRNA cDNA Synthesis Mix kit contains all the components necessary to convert mature microRNAs into cDNA templates for qPCR.
MIRRT
MystiCq® microRNA-cDNA-Synthese-Mischung
Synonym(e):
microRNA cDNA Synthesis Mix
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Über diesen Artikel
UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.55
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cDNA synthesis: suitable
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Allgemeine Beschreibung
Bei Verwendung von Gesamt-RNA, vorangereicherten Proben oder microRNAs als Ausgangsbasis enthält das MystiCq®-microRNA-cDNA-Synthesemischungs-Kit alle notwendigen Komponenten zur Umwandlung von reifen microRNA in cDNA-Matrizen für qPCR. Da microRNA nicht von Natur aus polyadenyliert sind, besteht der erste Schritt im cDNA-Syntheseprozess darin, die microRNA durch eine Poly(A)-Polymerase-Reaktion zu polyadenylieren. Anschließend werden ReadyScript für die reverse Transkriptase, ein Oligo-dT-Adapter-Primer und andere erforderliche Reagenzien zugegeben, um die polyadenylierten microRNA in cDNA umzuwandeln. Der Adapter-Primer enthält am 5‘-Ende eine einzigartige Sequenz, die komplementär für die Sequenz des MysticCq Universal PCR-Primers ist, eine weitere Komponente des MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Systems. Das Kit enthält außerdem einen Positivkontrolle-Primer, der für SNORD44 spezifisch ist, eine kleine nukleäre RNA, die verbreitet in den meisten menschlichen Geweben exprimiert wird. Das Kit enthält ausreichende Mengen des Poly(A)-Tailing-Puffers und des MicroRNA-cDNA-Reaktionsgemisches, um die Verwendung von Kontrollreaktionen ohne Poly(a)-Polymerase und reverse Transkriptase (NRT) zu ermöglichen. Zur Analyse einzelner microRNA den MystiCq-Universal-PCR-Primer (der sich gegen die Adapterprimer-Sequenz richtet) zusammen mit dem MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Primer und dem MystiCq®-microRNA-SYBR®-Green-qPCR ReadyMix™ verwenden.
Anwendung
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Da die Polyadenylierung und die reverse Transkription in getrennten Schritten erfolgen, kann das Protokoll bei Bedarf optimiert werden
- Die hergestellte cDNA kann zur künftigen Verwendung archiviert werden
- Eine einzelne RT-Reaktion kann bis zu 1000 qPCR-Reaktionen liefern
- Enthält einen Positivkontrollprimer zur Verwendung mit den meisten Humangeweben
Verpackung
Das Standardreaktionsvolumen ist 20 μL
Rechtliche Hinweise
MystiCq is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
SYBR is a registered trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries
Nur Kit-Komponenten
Produkt-Nr.
Beschreibung
- Poly (A) Tailing Buffer (5X)
- Human Positive Control Primer
- Nuclease-free Water
- MystiCq® Universal PCR Primer
- Poly (A) Polymerase
- microRNA cDNA Reaction Mix
- ReadyScript® Reverse Transcriptase
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10 - Combustible liquids
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Sigma’s Imprint RNA Immunoprecipitation Kit was used to copurify human argonaute 2 (Ago2)-associated RNAs from HeLa cells. MicroRNAs reverse transcribed and quantitating using Mysticq reagents.
PCR master mix simplifies PCR/RT-PCR with components like DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, and buffer, available commercially or DIY.
Protokolle
Verfahren für Aufreinigung, reverse Transkription und quantitative PCR für MicroRNA mit MystiCq-Reagenzien
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Instructions
-
I want to work with the cDNA of mARN, can I synthetize the cDNA of the mARN starting from a Total ARN sample using this kit? Or does the kit only synthetize the cDNA from the microARN?
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