COLLDISP-RO

Collagénase/dispase^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Synonyme(s) : collagénase
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• Biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)

Propriétés

• biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• packaging: pkg of 100 mg (10269638001), pkg of 500 mg (11097113001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• technique(s): tissue processing: suitable
• color: light yellow to brown
• optimum pH: 7.0-8.0
• solubility: water: soluble
• UniProt accession no.: P43154
• application(s): life science and biopharma; sample preparation
• foreign activity: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• storage temp.: 2-8°C

Description

General description

La Dispase est une protéase neutre, d′action rapide mais douce, qui sépare l′épiderme intact du derme. Elle sépare également du substrat de culture les cellules épithéliales intactes. Elle clive la zone de la membrane basale et laisse les cellules épithéliales intactes. La collagénase est une protéase qui clive la protéine en triple hélice appelée collagène. Il existe trois types de collagénases tissulaires, qui appartiennent à la famille des métalloprotéinases matricielles (MPM). La collagénase issue de Clostridium histolyticum est particulièrement réactive, car elle digère le collagène par ses deux extrémités à des températures aussi basses que 4-10 °C.

Application

La collagénase/Dispase^® est utilisée dans la préparation de cellules provenant d′un vaste éventail de tissus et organes.

Biochem/physiol Actions

La collagénase dégrade le collagène natif. La Dispase^® est une protéase non spécifique.

Preparation Note

Activateur : Ca²⁺

Concentration de travail : Environ 1 mg/ml (collagénase : 0,1 U/ml, Dispase : 0,8 U/ml)

Activité enzymatique :
Collagénase : 0,1 U/mg de lyophilisat (selon Wünsch) (à +25 °C, substrat : 4-phényl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg)
Dispase^® : 0,8 U/mg de lyophilisat (selon Wünsch) (à +37 °C, substrat : caséine, pH 7,5)
Contamination par activités protéolytiques : <0,1 U/mg de lyophilisat (substrat : hémoglobine)

Solution de travail : Préparation de la solution de travail Dissoudre l′enzyme dans de l′eau à une concentration finale de 100 mg/ml. Diluer avec PBS (sans Ca²⁺/Mg²⁺) à une concentration finale de 1 mg/ml et filtrer à travers une membrane de 0,2 μm.
Concentration enzymatique de la solution stérile : collagénase, 0,1 U/ml dans PBS, Dispase^®, 0,8 U/ml de PBS.

Inhibiteurs :
Inhibiteurs de collagénases : EDTA, EGTA
La collagénase/Dispase n′est pas inhibée par le sérum.

Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25°C
La solution reconstituée est stable entre -15 et -25°C.
Remarque : stockez en parts aliquotes de taille adaptée et évitez les congélations et décongélations répétées.

Reconstitution dans l′eau à 100 mg/ml. Dilution ultérieure avec une solution tampon phosphate (PBS) sans Ca²⁺/Mg²⁺.

À conserver au sec.

Other Notes

Collagénase issue de Vibrio alginolyticus, Dispase^® issue de Bacillus polymyxa

N° EC 3.4.24.3 et 3.4.24.3

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Une unité correspond à l'activité enzymatique qui libère, en 1 minute et dans les conditions du test, des peptides et des acides aminés positifs au réactif de Folin correspondant à 1 μmol de tyrosine.

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS07,GHS08
• Mot-clé: Danger
• Mentions de précaution: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organes cibles: Respiratory system
• Classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Que se passe-t-il ?: WGK 1
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash
• Codes de danger: H315,H319,H334,H335