ADN ligase T4

L′ADN ligase T4 DNA catalyse la formation de liaisons phosphodiester entre les extrémités 3′-hydroxyl- et 5′-phosphate avoisinantes dans l′ADN double brin. Les coupures simple brin dans l′ADN double brin sont également fermées par l′ADN ligase T4.

Contenu du kit
ADN ligase T4, fournie avec tampon de ligation 10x concentré avec ATP.

Ligation des fragments d′ADN à extrémités cohésives et franches.[1][2][3]

Inactivation à la chaleur : L′enzyme peut être inactivée en la chauffant (65 °C, 10 minutes).

Activateur : Mg²⁺ (10 mM), DTT
Solution de travail : Pour diluer cette enzyme, Roche recommande d′utiliser un tampon contenant les mêmes composants que le tampon de stockage : Tris-HCl 20 mM, KCl 60 mM, EDTA 1 mM, dithiothréitol 5 mM, glycérol 50 % (v/v), pH 7,5 (à 4 °C).

Qualité

L′absence de désoxyribonucléases et d′exonucléases a été testée conformément aux procédures de contrôle qualité en vigueur.

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Une unité d′ADN ligase T4 DNA est l′activité enzymatique qui convertit 1 nmol ³²P de pyrophosphate en matière absorbable par Norit en 20 minutes à +37 °C. Une unité correspond à 0,2 U selon le test de résistance à l′exonuclease III. Tampon de dilution : Tris/HCl à 50 mM, dithioérythritol à 10 mM, Albumine de sérum bovin à 500 μg/ml, pH 7,6 (+25 °C).

Activité volumique : 1 x 10³ U/ml ; 5 x 10³ U/ml