Zellseparationsmedien für Forschung, Diagnostik und pharmazeutische Anwendungen

ZELLTRENNUNG MIT ACCUSPIN™ SYSTEM-HISTOPAQUE^® MEDIEN

Das beliebte ACCUSPIN™ System mit Histopaque^®-1077 verwendet strahlensterilisierte Zentrifugenröhrchen, die so konzipiert sind, dass zwei getrennte Kammern mit einer porösen Barriere aus Polyethylen hoher Dichte ("Fritte") entstehen. Dieses System ermöglicht die Zugabe von antikoaguliertem Vollblut in die obere Kammer ohne das Risiko einer Vermischung mit dem Histopaque^®-Trennmedium in der unteren Kammer. Histopaque^®-Dichtesortiermedien ermöglichen eine klare Trennung von Lymphozyten und mononukleären Zellen (d. h. Monozyten). Erythrozyten aggregieren und Granulozyten werden leicht hypertonisch, was ihre Sedimentationsrate erhöht und zu einer Pelletierung am Boden des ACCUSPIN™-Röhrchens führt. Nach Abschluss des Trennungsprozesses können die isolierten Zellen weiter charakterisiert, kultiviert, analysiert oder in nachgeschalteten Anwendungen wie Durchflusszytometrie, zellbasierten Assays, molekularer Analyse, pharmazeutischer oder zelltherapeutischer Entwicklung verwendet werden.

HISTOPAQUE^® IODINATED GRADIENT MEDIA

Histopaque^® Medien wurden entwickelt, um verschiedene Zelltypen auf der Grundlage ihrer Dichte zu trennen und werden häufig in der pharmazeutischen und biomedizinischen Forschung zur Isolierung und Reinigung spezifischer Zellpopulationen verwendet. Histopaque^®-Medien sind steril gefilterte, endotoxingetestete Lösungen aus Polysucrose und Natriumdiatrizoat, die auf genaue Dichten eingestellt sind. Diese gebrauchsfertigen Trennmedien ermöglichen die schnelle und optimale Gewinnung lebensfähiger Zellen aus kleinen Vollblutmengen. Histopaque^®-Separationsmedien werden typischerweise für folgende Anwendungen eingesetzt: Isolierung mononukleärer Zellen aus peripherem Blut (PBMC): Histopaque^®-Medien werden häufig zur Isolierung von PBMCs aus Vollblutproben verwendet. PBMCs bestehen aus Lymphozyten, Monozyten und anderen kernhaltigen Zellen. Indem das Histopaque^®-Medium zwischen die Blutprobe und ein Zentrifugenröhrchen gelegt wird, bewirkt die Zentrifugation die Trennung der PBMCs von anderen Blutbestandteilen, wie z. B. roten Blutkörperchen und Blutplättchen. Zellfraktionierung: Histopaque^®-Medien können verwendet werden, um gemischte Zellpopulationen auf der Grundlage ihrer Dichte in verschiedene Schichten zu fraktionieren. Durch Schichtung des Trennmediums in einem Zentrifugenröhrchen und vorsichtige Zugabe der Zellsuspension werden durch Zentrifugation unterschiedliche Schichten gebildet, die verschiedene Zelltypen repräsentieren. Diese Technik ist nützlich für die Trennung und Reinigung von Zellen für weitere Analysen oder Experimente. Isolierung von spezifischen Zelltypen: Histopaque^®-Trennmedien können verwendet werden, um bestimmte Zellpopulationen auf der Grundlage ihrer Dichte oder spezifischer Marker zu isolieren. Durch sorgfältiges Aufschichten des Trennmediums und der Zellsuspension werden durch Zentrifugation die gewünschten Zellen von den unerwünschten Zellen getrennt. Diese Technik ist besonders wertvoll für Forscher, die bestimmte Zelltypen untersuchen oder seltene Zellpopulationen anreichern wollen. Die unter ISO  9001-Qualitätsmanagement hergestellten Histopaque^®-Produkte mit chargenspezifischen Leistungstests bieten eine konstant selektive Trennung von Blutzelllinien, eine optimale Trennung lebensfähiger, unverzerrter Zellen und eine minimale Störung durch Fremdzellen.

PERCOLL^® KOLLOIDALE SILIKAMEDIEN

Kolloidale Silika-Medien sind kolloidale Suspensionen von Silika-Partikeln, die mit Polyvinylpyrrolidon (PVP) mit einem Durchmesser von 15-30 nm beschichtet sind und typischerweise in der biomedizinischen und pharmazeutischen Forschung zur Zellseparation und -reinigung verwendet werden. PVP verringert die Wechselwirkungen der Partikel mit dem biologischen Material und stabilisiert das Kolloid in einer isotonischen Kochsalzlösung. Die Dichte kann durch Änderung der Konzentration der Percoll^®-Lösung eingestellt werden, so dass die Forscher den Gradienten an ihre spezifischen Trennungsanforderungen anpassen können. Unser kolloidales Percoll^®-Medium hat eine extrem niedrige osmotische Stärke, die sich mit der Dichte kaum ändert. Außerdem lässt sich die Osmolalität der durch Zentrifugation gebildeten Gradienten leicht durch Zugabe einer geeigneten Menge Saccharose oder Pufferlösung einstellen. Die Percoll^®-Gradienten sind ideal für die isopyknische Trennung von Zellen, Organellen, Membranvesikeln und sogar einigen Viren.

INORGANISCHE SALZE

Ionische Gradientenmedien, auch bekannt als ionische Gradienten oder ionische Lösungen, werden in Zellseparationstechniken verwendet, um Zellen aufgrund ihrer Oberflächenladung oder ihrer elektrischen Eigenschaften zu trennen. Diese Medien erzeugen ein elektrostatisches Feld oder ein Ladungsgefälle, das die Trennung von Zellen mit unterschiedlichen Oberflächenladungen ermöglicht. Beispiele für Zellseparationstechniken, bei denen Ionengradientenmedien verwendet werden, sind Elektrophorese, Dielektrophorese (DEP) und isoelektrische Fokussierung (IEF). Die spezifische Wahl des Mediums und der Technik hängt von der Art der zu trennenden Zellen, dem gewünschten Trennungsmechanismus und den allgemeinen Versuchszielen ab. Unsere ionischen Gradientenmedien, die aus konzentrierten Schwermetallsalzen bestehen, werden ausschließlich für isopyknische Trennungen von Nukleinsäuren verwendet. Cäsiumchlorid und Cäsiumsulfat sind die am häufigsten verwendeten Schwermetallsalze mit Gradientendichten von bis zu 1,91 g/cm³. Andere Salze sind Natriumjodid, Natriumbromid und Rubidiumsalze. Bei der Auswahl und Gestaltung von Ionengradientenmedien und -techniken müssen Faktoren wie pH-Wert, Leitfähigkeit, Pufferzusammensetzung und die elektrischen Eigenschaften der zu untersuchenden Zellen sorgfältig berücksichtigt werden.

NONIONISCHE IODINIERTE DICHTEGRADIENTENMEDIEN

NONIONISCHE IODINIERTE DICHTEGRADIENTENMEDIEN sind Spezialsubstanzen, die für Trenn- und Reinigungstechniken in verschiedenen Bereichen, einschließlich Biologie, Biochemie und klinischer Diagnostik, verwendet werden. Diese Medien basieren in der Regel auf iodierten Verbindungen, die Dichtegradienten bilden und die Trennung von Partikeln auf der Grundlage ihrer Dichte ermöglichen. Nichtionische iodierte Dichtegradientenmedien funktionieren nach dem Prinzip der Dichtegradientenzentrifugation. Die Strukturen der meisten iodierten Verbindungen, die in den gängigen Dichtegradientenmedien verwendet werden, basieren auf iodierten Verbindungen wie Trijodbenzoesäure, an die eine hydrophile Gruppe angehängt ist, um ihre Löslichkeit zu erhöhen und einen kontinuierlichen Dichtegradienten in wässriger Lösung zu bilden. Wir bieten dichtere Iohexol-Lösungen (z. B. Nycodenz^® und Histodenz™), die die Dehydratisierung biologischer Partikel minimieren. Iohexol ist ungiftig und wird von Säugetierzellen nicht verstoffwechselt.

POLYHYDRISCHE ALKOHOLE

Unser Angebot an nichtionischen Gradientenmedien mit mehrwertigen Alkoholen umfasst Saccharosegradienten, die für die zonale Trennung von Makromolekülen und für die isopyknische Trennung von Viren und Zellorganellen weit verbreitet sind. Zu den Vorteilen gehören ihre Stabilität, ihre Inertheit und ihre geringen Kosten, zu den Nachteilen hingegen die konzentrierte und hypertonische Beschaffenheit der Lösung. Wir bieten auch Glycerinlösungen an, die eine geringere Dichte als die entsprechenden Saccharoselösungen haben, wodurch die Aktivität bestimmter Enzyme verhindert wird, während sie leicht durch Vakuum entfernt werden können.

POLYSACCHARIDE

Wir bieten das am häufigsten verwendete Polysaccharidmedium, Ficoll^®, an, um die Probleme der hohen osmotischen Stärke zu umgehen, die bei der Verwendung von Saccharoselösungen auftreten. Die synthetischen Polymere Ficoll^® sind mit Polyvinylpyrrolidon beschichtete Poly(ethylenglycol) (PEG), die üblicherweise zur Herstellung von Dichtegradientenlösungen verwendet werden. Ficoll^®-Lösungen sind in verschiedenen biologischen und biochemischen Anwendungen weit verbreitet, insbesondere für die Trennung und Isolierung von Zellen. Die Lösung wird durch die Polymerisation von Saccharosemolekülen mit Epichlorhydrin hergestellt, wodurch ein Polysaccharid mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 400.000 entsteht. Ficoll^®-Lösungen unter 20% (w/v) haben eine Dichte von 1,07 g/cm3 und gelten als osmotisch inert. Der Hauptnachteil von Ficoll^®-Lösungen besteht darin, dass sie zähflüssiger sind als vergleichbare Saccharoselösungen. Ficoll^®-Lösungen spielen in verschiedenen pharmazeutischen Forschungs- und Entwicklungsprozessen eine wichtige Rolle, da sie die Isolierung, Reinigung und Charakterisierung von Zellen, Viren und anderen biologischen Komponenten erleichtern und so zu Fortschritten in der Arzneimittelforschung, Immuntherapie und anderen pharmazeutischen Anwendungen beitragen. Sie werden häufig in Zellseparationstechniken eingesetzt, insbesondere zur Isolierung mononukleärer Zellen aus peripherem Blut oder anderen Zellquellen. Durch Aufschichten der Zellsuspension auf einen Ficoll^®-Dichtegradienten und Zentrifugieren können die gewünschten Zellen, wie Lymphozyten oder Monozyten, von anderen Zelltypen und unerwünschten Bestandteilen wie roten Blutkörperchen und Granulozyten getrennt werden. Ficoll^®-Lösungen werden auch bei der Dichtegradientenzentrifugation verwendet, einer Technik, bei der Partikel oder Moleküle auf der Grundlage ihrer Auftriebsdichte getrennt werden. Während der Zentrifugation wandern die Partikel oder Zellen durch den Ficoll^®-Gradienten und setzen sich an Positionen ab, die ihrer jeweiligen Dichte entsprechen. Dies ermöglicht die Trennung und Fraktionierung verschiedener Komponenten in einem heterogenen Gemisch.