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Informazioni su questo articolo
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Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
purified immunoglobulin
Clone
CMA309, monoclonal
Reattività contro le specie
vertebrates, human
Produttore/marchio commerciale
ChIPAb+
Upstate®
tecniche
ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG
N° accesso NCBI
Condizioni di spedizione
dry ice
1 of 4
Questo articolo | 17-10241 | 17-10111 | 17-643 |
|---|---|---|---|
| clone CMA309, monoclonal | clone polyclonal | clone polyclonal | clone polyclonal |
| antibody form purified immunoglobulin | antibody form serum | antibody form serum | antibody form serum |
| species reactivity vertebrates, human | species reactivity mouse, bovine, Saccharomyces cerevisiae, human | species reactivity Saccharomyces cerevisiae, yeast, human | species reactivity human, mouse |
| biological source mouse | biological source rabbit | biological source rabbit | biological source rabbit |
| technique(s) ChIP: suitable, western blot: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable | technique(s) ChIP: suitable, western blot: suitable | technique(s) ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, western blot: suitable | technique(s) ChIP: suitable, electrophoretic mobility shift assay: suitable, flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable |
| shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice |
Descrizione generale
Il set ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys27) include l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), un anticorpo di controllo negativo (IgG purificate di topo) e i primer per la qPCR che amplificano una regione di 178 pb all′interno del promotore del gene RPL10 umano. Gli anticorpi anti-acetil-istone H3 (Lys27) e di controllo negativo sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e si possono usare per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata all′acetil-istone H3 (Lys27).
Immunogeno
Applicazioni
Epigenetica & funzione nucleare
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer della ChIP specifici per il promotore della β-globina rispetto ai primer del promotore di RPL10 (si vedano le figure). I dati sono presentati come percentuale di input di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ogni amplicone e campione ChIP come indicato.
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-408) o di EZ-ChIP (N. Cat. 17-371).
Analisi mediante Western blotting:
gli estratti acidi ottenuti da cellule HeLa non trattate (corsia 1) e trattate con butirrato di sodio (corsia 2) sono stati risolti mediante elettroforesi, trasferiti su una membrana di PVDF e analizzati con l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), clone CMA309 (0,1 μg/mL). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo secondario di capra
anti-topo coniugato con HRP e un sistema di rivelazione per chemiluminescenza (si vedano le figure).
Biologia della cromatina
Azioni biochim/fisiol
Confezionamento
Stato fisico
IgG di topo normale. Due microprovette contenenti 25 μg di IgG di topo purificate in 25 μL di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,1%. Conservare a -20°C.
Primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico per la regione del promotore di RPL10 umano alla concentrazione 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG
Nota sulla preparazione
Risultati analitici
Include un anticorpo di controllo negativo costituito da IgG di topo e primer di controllo specifici per il promotore di RPL10 umano.
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611).
La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10 (si vedano le figure).
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-409) o di EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
Note legali
Esclusione di responsabilità
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
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Epigenetics describes heritable changes in gene expression caused by non-genetic mechanisms. Epigenetic regulation allows a cell to vary its response based on its biological and environmental contexts. Epigenetic changes can effect transcriptional and post-transcriptional regulation via mechanisms such as histone modification, chromatin and nucleosome remodeling, DNA methylation, and small and non-coding RNA-mediated regulation. These mechanisms, in cooperation with transcription factors and other nucleic acid-binding proteins, regulate gene expression. Epigenetic mechanisms of gene regulation impacts diverse areas of research—from agriculture to human health. Common epigenetic assays such as chromatin immunoprecipitation (ChIP) and RNA immunoprecipitation (RIP) rely on high quality antibodies that recognize specific epigenetic modifications for accurate results. EMD Millipore offers over 100 ChIPAb+™ and RIPAb+™ validated antibody kits that are quality tested on ChIP/RIP assays and are conveniently provided with control qPCR primers and negative control antibodies to ensure first time ChIP/RIP success.
"Epigenetics describes heritable changes in gene expression caused by non-genetic mechanisms instead of by alterations in DNA sequence. These changes can be cell- or tissue-specific, and can be passed on to multiple generations. Epigenetic regulation enriches DNAbased information, allowing a cell to vary its response across diverse biological and environmental contexts. Although epigenetic mechanisms are primarily centered in the nucleus, these mechanisms can be induced by environmental signals such as hormones, nutrients, stress, and cellular damage, pointing to the involvement of cytoplasmic and extracellular factors in epigenetic regulation."
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