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Merck

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F3165

Anticorps monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse

clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal

Synonyme(s) :

Anti-ddddk, Anti-dykddddk

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A propos de cet article

NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352203
Conjugate:
unconjugated
Clone:
M2, monoclonal
Application:
WB
Citations:
8404

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biological source

mouse

Quality Segment

conjugate

unconjugated

antibody form

purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass)

antibody product type

primary antibodies

clone

M2, monoclonal

form

buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

purified by

using Protein A

species reactivity

all

concentration

3.8-4.2 mg/mL

technique(s)

western blot: 10 μg/mL (Protein A)

isotype

IgG1

immunogen sequence

DYKDDDDK

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

General description

L'anticorps anti-Flag M2 permet de détecter les protéines de fusion portant une étiquette Flag. Cet anticorps monoclonal est produit chez la souris et reconnaît la séquence FLAG au niveau des extrémités N-terminale, Met N-terminale et C-terminale. Cet anticorps est également capable de reconnaître la séquence FLAG au niveau d'un site interne. Contrairement à l'anticorps M1, l'anticorps M2 n'est pas dépendant du calcium.
La référence F3165 est purifiée par affinité sur une résine avec de la protéine A : elle contient donc non seulement l'anticorps anti-FLAG M2 mais aussi de petites quantités d'IgG native de souris, ce qui augmente sa sensibilité dans la plupart des applications.
Méthode de purification - Protéine A

Immunogen

FLAG ; séquence peptidique DYKDDDDK

Application

L'anticorps monoclonal M2 ANTI-FLAG® produit chez la souris est utilisé dans les applications suivantes :
  • Immunoblotting/Immunotransfert
  • Immunoprécipitation
  • Immunocytochimie
  • Immunofluorescence
  • Dosages ELISA
  • Dosages immunoenzymatiques
  • Immunoprécipitation de la chromatine
  • Microscopie électronique
  • Cytométrie en flux
  • Tests supershift

Consultez notre portail Littérature sur le système FLAG® pour découvrir d'autres références sur cette application.

Preparation Note

Diluer la solution d'anticorps à raison de 0,5-10 µg/ml dans une solution saline tamponnée au Tris, pH 8,0, avec 3 % de lait écrémé
Stocker l'anticorps non dilué à -20 °C en aliquotes de travail. Il n'est pas recommandé de procéder à des congélations et décongélations répétées.
Remarque : Au fil du temps, de petites quantités d'anticorps purifiés peuvent précipiter à partir de la solution en raison d'interactions hydrophobes intermoléculaires. Si un précipité est observé dans ce produit, centrifuger brièvement le flacon pour obtenir un culot contenant le précipité. Prélever le volume de solution d'anticorps souhaité dans le surnageant limpide avant utilisation. Cela ne devrait pas altérer la performance de l'anticorps purifié dans les applications de western blotting ou d'immunoprécipitation.

Legal Information

ANTI-FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Cet article
F1804F2426A2220
clone

M2, monoclonal

clone

M2, monoclonal

clone

M2, monoclonal

clone

M2, monoclonal

conjugate

unconjugated

conjugate

unconjugated

conjugate

-

conjugate

agarose conjugate

antibody form

purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass)

antibody form

affinity isolated antibody

antibody form

-

antibody form

purified immunoglobulin

species reactivity

all

species reactivity

all

species reactivity

-

species reactivity

-

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

-

biological source

-

form

buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

form

buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)

form

-

form

buffered aqueous glycerol solution


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12 - Non Combustible Liquids

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Not applicable

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Questions

1–7 of 7 Questions  
  1. What is the recommended short-term storage condition for FLAG M2 antibody — is 4°C acceptable?

    1 answer
    1. To enhance stability & functional consistency, store the undiluted antibody at −20 °C in working aliquots. Repeated freezing and thawing is not recommended.

      Helpful?

  2. What is the recommended dilution for immunocytochemistry for this product ?

    1 answer
    1. This product has not been validated for immunocytochemistry applications.

      Helpful?

  3. Is there a recommended dilution for capture (sandwich) based ELISA?

    1 answer
    1. Monoclonal ANTI-FLAG® M2 may be used in EIA procedures. Typically, a fusion protein containing a FLAG® peptide sequence is directly adsorbed (or otherwise presented) within the wells of a multiwell polystyrene plate. The Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody may be diluted up to 1:50,000 for subsequent incubation within the plate wells. Detection may be accomplished using Anti-Mouse IgG-Peroxidase (Cat. No. A9044) or equivalent, diluted 1:10,000, followed by an appropriate substrate for visualization.

      Dilutions for use as the capture antibody in an ELISA have not been evaluated. We would recommend that the end-user optimize the protocol following the recommendations found here:
      https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocol/protein-biology/elisa/elisa-procedures#antigen_coating

      Helpful?

  4. What is the recommended dilution for conducting western blotting using this antibody?

    1 answer
    1. The recommended dilution for Western Blot is 10 µg/mL. Please see the link below to review additional information, including protocols:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/274/912/f3165dat-ms.pdf

      Helpful?

  5. What is the difference between F1804 and F3165 product?

    1 answer
    1. Product F1804 and F3165 are both Monoclonal ANTI-FLAG M2 antibodies produced in mouse Clone M2, with the same starting material. The distinction between the products lies in their purification methods. F3165 is immunoglobulin purified, while F1804 is immunogen affinity purified. F1804, being more purified, is expected to exhibit reduced background and less non-specific staining compared to F3165. Both products are suitable for western blotting, immunofluorescence, and immunoprecipitation.

      Helpful?

  6. What is the recommended dilution for conducting immunoprecipitation (IP) using the M2 antibody?

    1 answer
    1. The general starting recommendation for conducting immunoprecipitation (IP) using the F3165, anti-FLAG M2 antibody, is 10 μg/mL.

      Helpful?

  7. What type of light chain is present on the FLAG M2 antibody?

    1 answer
    1. Test has not been conducted to determine whether the light chains of the antibody F3165, Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse, are kappa or lambda. However, based on customer feedback, it appears that the M2 monoclonal antibody has lambda light chains and not kappa. A probe with anti-kappa did not yield a signal, while anti-lambda produced a good signal.

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Reviews

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  1. New Jersey
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    • Votes 15
    5 out of 5 stars.

    Great Anti Flag primary

    Works well for our western blot analysis of flag tagged recombinant proteins

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