Herstellung mikrobiologischer Nährmedien
Bei der Formulierung mikrobiologischer Nährmedien werden Nährstoffe, Puffer und Mittel zur Erhaltung des osmotischen Gleichgewichts sowie selektive Hemmstoffe oder Indikatoren gemischt, um ein Agar- oder Bouillonmedium herzustellen, welches das Wachstum und die Differenzierung von Mikroorganismen unterstützt. Die Herstellung mikrobiologischer Nährmedien ist eine Routinearbeit bei der regelmäßigen Kontrolle auf Verderbniserreger und Pathogene in mikrobiologischen Untersuchungen.
Arten von Nährmedien
Mikrobiologische Nährmedien sollen optimale Wachstumsbedingungen für alle oder spezifische Arten von Mikroorganismen bereitstellen. Die genaue Formulierung eines Nährmediums hängt von der zu kultivierenden Spezies und dem Ziel der Anwendung ab. Der pH-Wert des Nährmediums muss je nach Mikroorganismus eingestellt werden. Mikrobiologische Nährmedien werden nach verschiedenen Parametern wie chemischen Bestandteilen, physikalischer Beschaffenheit und Funktion eingestuft. Die anhand dieser Parameter definierten Nährmedien sind nachstehend beschrieben.
Zugehörige technische Artikel
- Microorganisms need nutrients, a source of energy and certain environmental conditions in order to grow and reproduce. In the environment, microbes have adapted to the habitats most suitable for their needs, in the laboratory, however, these requirements must be met by a culture medium.
- Technical Article on yeast media. Yeasts are eukaryotic microorganisms whose genomes have been comprehensively studied and some have been sequenced.
- Introduction to Microbiology Theory. An initial aim of all microbiologists is the reproducible growth of their microbial cultures, no matter whether the microorganisms are of natural origin or have been genetically engineered by man.
- For microbiologists the most fundamental stain was developed in 1884 by the Danish bacteriologist Hans Christian Gram.
- This article will focus on results obtained for MC-Media Pad RAC, MC-Media Pad Coliform, MC-Media Pad E. coli & Coliform & MC-Media Pad Yeast & Mold.
- Alle anzeigen
Verwandte Protokolle
- Yeast Drop Out Bulletin. The selection of plasmids in yeast is based on the use of auxotrophic mutant strains, which cannot grow without a specific medium component (an amino acid, purine or pyrimidine). Transformation with a plasmid containing the mutated gene enables the transformant to grow on a medium lacking the required component. Although yeast can grow on a synthetic medium without any amino acids, better yield and growth rate can be achieved on richer media.
- Routine water and beverage microbiological analysis using the 55-Plus™ Monitor
- The International Organization for Standardization (ISO) published the revised EN ISO 21528-1 and EN ISO 21528-2 standards in 2017.
- Comparison of MC-Media Pad® with different convenience solution products for indicator organism testing
- Public Health England (PHE) video contains storage conditions and directions for preparing LENTICULE discs as reference materials within solid and liquid media.
- Alle anzeigen
Einstufung mikrobiologischer Nährmedien nach chemischer Zusammensetzung
Synthetische (definierte) Nährmedien sind in ihrer chemischen Zusammensetzung genau definiert und werden häufig zur Kultivierung von photoautotrophen Organismen wie Cyanobakterien und photosynthetischen Protisten eingesetzt. Diese Medien werden verbreitet in der Forschung zur Untersuchung des Stoffwechsels von Mikroorganismen verwendet.
Komplexe Nährmedien enthalten nicht definierte chemische Bestandteile wie Pepton, Fleischextrakt und Hefeextrakt, die den Nährstoffbedarf verschiedener Mikroorganismen decken. Sie werden zur Kultivierung anspruchsvoller Mikroorganismen mit komplexen Nährstoffanforderungen verwendet.
Mikrobiologische Nährmedien nach physikalischer Beschaffenheit
Feste Medien enthalten 1-7 % Agar-Agar oder 10-20 % Gelatine zur Verfestigung der Nährbouillon. Feste Medien werden zur Isolierung verschiedener Mikroorganismen voneinander, zum Anlegen reiner Kulturen und zur Herstellung von Schrägagar und Stichagar eingesetzt.
Flüssige Medien enthalten keine Verfestigungsmittel. Nach der Beimpfung und Inkubation werden Zellen in Form von kleinen Massen oder einer Trübung der Bouillon sichtbar.
Mikrobiologische Nährmedien nach Herstellungsmethode
Fertigmedien sind feste oder flüssige Medien, die in Platten, Flaschen, Röhrchen oder anderen Behältern angeboten werden und entweder sofort oder nach erneutem Einschmelzen und Supplementieren gebrauchsfertig sind.
Nährmedien aus kommerziell dehydrierten Formulierungen sind Trockenmedien, die vor der Verwendung rehydriert und verarbeitet werden müssen. Sie ergeben entweder vollständige oder unvollständige Medien, die vor Gebrauch supplementiert werden.
Nährmedien aus einzelnen Komponenten werden von mikrobiologischen Laboren von Grund auf aus ihren einzelnen Bestandteilen hergestellt.
On-demand-Medien werden von einem System hergestellt, das hochkonzentriertes, steriles Nährmedium über mehrere Tage in einem Labor bereithält. Durch Verdünnung mit sterilem Wasser kann es bei Bedarf eine benötigte Menge an gebrauchsfertigem Medium herstellen, ohne dass eine Autoklavierung erforderlich ist.
Herstellung mikrobiologischer Nährmedien
Die Herstellung von Nährmedien aus dehydrierten kommerziellen Formulierungen soll nach den Anweisungen des Herstellers erfolgen. Die Formulierung grundlegender Bestandteile wie Peptone, Hefeextrakte, Agar, Puffersubstanzen und Antibiotika wird modifiziert, um einheitliche Nährmedien zu erhalten. Die erforderliche Menge an Trockenmedium oder einzelnen Bestandteilen wird unter ständigem Rühren in destilliertem Wasser gelöst und (falls erforderlich) anschließend erhitzt. Agarhaltige Nährmedien sollen vor dem Erhitzen unter ordnungsgemäßem Schütteln ausreichend durchnässt werden. Der pH-Wert muss eingestellt werden und das Medium wird zur Sterilisation durch feuchte Hitze in einem Autoklaven in geeignete Behälter abgefüllt. Hitzeempfindliche Substanzen (z. B. Proteine, Enzyme) werden durch Membranfiltration sterilisiert.
Nährmedien müssen bei spezifizierten Temperaturen aufbewahrt werden, um eine Veränderung der Zusammensetzung zu vermeiden. Die Aufbewahrung darf dabei die Haltbarkeitsdauer des Produkts nicht überschreiten. Eine aseptische Herstellung und Aufbewahrung ist unerlässlich, um das Nährmedium vor einer mikrobiellen Infektion zu schützen. Wasserverluste bei der Aufbewahrung können durch undurchlässige Verpackungen und/oder Lagerung bei 5 °C ± 3 °C minimiert werden. Chemische Zersetzung, wie z. B. Oxidation oder ein Verlust antimikrobieller Aktivität, kann verzögert werden, indem die Medien vor Licht, Hitze und Austrocknen geschützt aufbewahrt werden.