Endonucleasi
Gli enzimi endonucleasici sono utilizzati per ridurre il livello di contaminazione degli acidi nucleici nei flussi di lavoro dei bioprocessi e nelle applicazioni di ricerca, scindendo DNA e RNA in frammenti più piccoli. Sebbene sia disponibile un'ampia varietà di fonti naturali, queste formulazioni di endonucleasi possono tuttavia rappresentare una sfida, in quanto possono contenere attività proteasica e contaminanti virali.
Benzonase® endonucleasi, una nucleasi geneticamente ingegnerizzata da Serratia marcescens, elimina il rischio dell'uso di endonucleasi di derivazione naturale e può degradare tutte le forme di DNA e RNA. Se utilizzata in condizioni di reazione appropriate, l'endonucleasi Benzonase® degrada tutte le forme di DNA e RNA (a singolo filamento, a doppio filamento, lineare e circolare) in oligonucleotidi di lunghezza compresa tra tre e cinque paia di basi. Ha un livello eccezionalmente alto di attività specifica senza alcuna attività proteolitica rilevabile.
Con alcuni modelli di produzione, l'uso di una concentrazione di sale superiore ai livelli fisiologici (200mM NaCl) può essere vantaggioso. L'endonucleasi Benzonase® Salt Tolerant consente di utilizzare concentrazioni di sale da 200mM a 1000mM NaCl per la fase di lisi intermedia e digestione del DNA durante la produzione di vettori di virus adeno-associati (AAV). Questa nuova aggiunta alla gamma di Benzonase® è compatibile con tutti i detergenti testati, compresi i detergenti Deviron®, che sono un'alternativa al Triton™ X-100.
Per saperne di più su bioprocessing e applicazioni per la ricerca di Benzonase® endonucleasi.
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Applicazioni di bioprocessing
L'endonucleasi Benzonase® è adatta alle applicazioni di bioprocessing più severe. Degrada gli acidi nucleici ben al di sotto della dimensione del frammento di 200 coppie di basi richiesta dall'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) e dalla Food and Drug Administration (FDA) degli Stati Uniti, viene rilasciata in condizioni GMP IPE-PQG e dispone di un Drug Master File presso la FDA che può essere citato nei documenti normativi.
È efficace in un'ampia gamma di condizioni operative e applicazioni, tra cui:
- Purificazione di vaccini virali e vaccini vettoriali virali
- Purificazione di terapie cellulari e geniche
- Purificazione di virus oncolitici
- Rimozione di DNA e RNA da proteine e altri prodotti biologici
- Rimozione del DNA di cellule ospiti
Sono disponibili tre versioni dell'endonucleasi IPEG PQG GMP Benzonase® per soddisfare diverse esigenze di produzione. Tutte fanno parte del programma Emprove® che facilita la preparazione dei documenti per le richieste di autorizzazione (Tabella 1).
Le endonucleasi Benzonase® sono preparate nel sistema di espressione E. coli W3110 e presentano un rischio minimo di contaminazione virale.
- Benzonasi® endonucleasi Emprove® Expert
- Benzonasi® L'endonucleasi Safety Plus Emprove® Expert è prodotta in un terreno chimicamente definito e ogni lotto è testato per verificare l'assenza di virus e micoplasmi avventizi.
- L'endonucleasi Benzonase® Salt Tolerant è anch'essa prodotta in un terreno chimicamente definito e ogni lotto è testato per l'assenza di micoplasmi; su richiesta è disponibile il test per i virus avventizi.
Siete interessati a un campione di Benzonase®? Se sì, cliccate sul pulsante qui sotto per saperne di più.
Applicazioni per la ricerca
L'endonucleasi Benzonase® può essere utilizzata per diverse applicazioni di ricerca tra cui:
- Rimozione del DNA dell'ospite da campioni di microbioma
- Miglioramento dell'identificazione dei taxa microbici per gli studi sul microbioma
- Prevenzione del clumping durante la ricerca sui vaccini
- Riduzione della viscosità del lisato durante i flussi di lavoro per l'estrazione di proteine ricombinanti, con conseguente miglioramento della resa della proteina target
È disponibile una varietà di opzioni di endonucleasi Benzonase® ad alta purezza e alta concentrazione.
L'endonucleasi Benzonase® è disponibile anche in confezione con reagenti per l'estrazione delle proteine per facilitare ulteriormente i flussi di lavoro.
- BugBuster® Master Mix: Reagente per l'estrazione delle proteine BugBuster® con endonucleasi Benzonase® e soluzione di rLysozyme
- Reagente di estrazione proteica BugBuster® HT: Reagente per l'estrazione delle proteine BugBuster ed endonucleasi Benzonase®
- CelLytic™ B Plus Kit: lisozima, Benzonase® endonucleasi e inibitori della proteasi
Informazioni tecniche | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Caratteristiche / Applicazione | Benzonase® endonucleasi Sicurezza (grado di purezza II ≥ 90%) Esperto | Benzonasi® endonucleasi Emprove® Esperto | Benzonasi® endonucleasi Plus Emprove® | Benzonasi® endonucleasi tollerante al sale Emprove® Expert | ||||
| Origine | Serratia marcescens, Produzione: E. coli K12 ceppo W3110; 30 kDa; PI 6.85; dati di omologia di sequenza | Piattaforma proprietaria di ingegneria delle proteine | ||||||
| Purezza | ≥ 90% | ≥ 99% | ≥ 99% | 99% | ||||
| Fabbricazione GMP secondo ICH Q7* | Si | Si | Si | |||||
| FDA Bulk Biological Master File (US-BBMF) & Emprove® | No | Sì | Sì | Emprove® Expert Dossiers disponibili, FDA DMF disponibile fino al 2024. | ||||
| Non di origine animale (NAO), ricombinante da E. coli in terreno di produzione chimicamente definito | No | No | Sì | Sì | Sì | Sì | SìSì | Sì |
| Spedizione con strisce di temperatura | No | No | Sì | Sì | ||||
| Campioni di coda per confezioni di grandi dimensioni | No | No | Sì (con unità di dimensioni pari a 5M) | Sì (con unità di dimensioni pari a 5M) | Sì | Sì (con unità di dimensioni 5M) | ||
| Test di rilascio del lotto in vitro per l'assenza di virus avventizi (3 linee cellulari) e test del micoplasma | No | No | Sì | Disponibile come opzione personalizzata* | ||||
| Test microbico sulle endotossine (LAL) | Non specificato < 10 CFU/100.000 U | < 0.25 EU/1.000 U < 10 CFU/100.000 U | < 0,25 EU/1.000 U < 10 CFU/100.000 U | < 0.25 EU/1.000 U < 10 CFU/100.000 U | ||||
| Cliente di destinazione | Ricerca | Vaccini virali< | Terapia virale e genica | Sviluppatori e produttori di processi farmaceutici, ricercatori accademici/governativi/ospedalieri, ricercatori farmaceutici/biotecnologici< | ||||
| Tutti i prodotti Benzonase® rimarranno nel nostro portafoglio< | ||||||||
| *Dichiarazione del produttore | ||||||||
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