FLAG® 纯化
FLAG®标签能对重组融合蛋白进行出色的检测和稳健的纯化，在从结合和活性检测到结构分析的众多下游应用中都得到了验证。FLAG® 表位标签是一种短小、亲水性强的八氨基酸肽（DYKDDDDK 标签），很容易被肠激酶（EK）裂解。由于 FLAG® 标签体积小且具有亲水性，因此通常位于融合蛋白的表面，从而最大限度地减少了对融合蛋白功能、分泌或运输的影响。无论您的最终应用是什么，我们都能提供表达、纯化和检测 FLAG® 融合蛋白所需的工具。
产品
FLAG® 标记蛋白质纯化
我们提供各种琼脂糖亲和纯化凝胶、磁珠、纯化试剂盒和涂布板，用于分离和纯化 FLAG® 标记蛋白。
- 琼脂糖亲和凝胶 使用交联到珠状琼脂糖上的抗FLAG® 抗体实现融合标记蛋白质的纯化，适用于小规模到大规模的纯化，这些树脂适用于重力流柱纯化。
- Anti-FLAG® M2磁珠 用于纯化重组融合标记蛋白，使用磁性架或平台分离磁珠和分离蛋白，以便快速处理。
- Anti-FLAG® High Sensitivity M2-coated 96-well plates are suitable for expression screening, the study of protein-protein interactions, and ELISA assays.
FLAG® 抗体选择指南
| 单克隆抗FLAG® M1 小鼠抗体/sup> M1小鼠抗体 | 单克隆抗FLAG® M2 抗体 M2 小鼠制备的抗体 | Monoclonal anti-FLAG®<小鼠制备的单克隆抗FLAG® M5抗体 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 目录编号 | F3040 | F1804 | F3165< | F4042 | |
| 克隆 | 克隆 | M1 | M2 | M2 | M5 |
| 形式 | 缓冲水溶液 | 缓冲甘油水溶液（不含叠氮化钠） | 缓冲水溶液（含叠氮化钠） | 缓冲水溶液 | |
| 免疫原序列 | DYKDDDDK | DYKDDDDK | DYKDDDDK | DYKDDDDK< | DYKDDDDK |
| 抗体纯化方法 | 抗体纯化方法？ | 在蛋白 A 分离糖上纯化 | 在专有的 FLAG®上纯化 多肽-琼脂糖 | 在蛋白 A 分离糖上纯化 | 在蛋白 A 分离糖上纯化 |
| KD | 53。4 nM | 9.3 nM | 9.3 nM | 不可用 | |
| 专一性 | 高度专一。仅识别位于游离 N 末端的 FLAG® 表位。 | 识别 FLAG® N-末端、Met-N-末端、 C-末端或 FLAG® 融合蛋白的任何内部位点的 FLAG® 序列。 | 强识别 Met-N FLAG® 融合蛋白。与 N 端或 C 端融合蛋白的结合力较弱。 | ||
| 灵敏度 | 在点印迹上检测 1 ng FLAG-BAP™ 融合蛋白 | 在点印迹上检测 2 ng 蛋白 | 在点印迹上检测 <1 ng Met-FLAG® fusion 蛋白 | ||
| 推荐用于： | 建议用于检测哺乳动物、植物和细菌表达系统中的 FLAG® 融合蛋白。对于亲和纯化非常有用。不建议用于检测细胞质表达蛋白。 | Western印迹检测在 E. | Western印迹检测在哺乳动物和嗜酸性粒细胞裂解物上表达的目标蛋白质。特别适用于检测细胞质表达的 Met-FLAG 融合蛋白。不建议用于检测在 大肠杆菌中表达的融合蛋白。大肠杆菌表达的融合蛋白 | ||
| 应用* | IP、IC、WB、EIA | IP、IC、WB、EIA | IP、IC、WB、EIA | WB | |
| 特殊要求 | 结合需要钙。(在没有钙离子的情况下，复合物将解离） | N/A | N/A | N/A | |
FLAG® 抗体结合特性
Antibody & binding characteristics< /p> | ANTI-FLAG M1 | 抗原-FLAG M1 | ANTI-FLAG M2 小鼠 IgG1 MAb | ANTI-FLAG |
|---|---|---|---|---|
| 未加工的 N 端 FLAG 融合蛋白： 信号肽 - FLAG - 蛋白质 | - | + | 未确定 | |
| Met-N-末端 FLAG 融合蛋白： Met - FLAG -Protein | - | + | ++ | |
| N-末端 FLAG 融合蛋白： FLAG - 蛋白质 | + | + | Weak | |
| 内部 FLAG 肽： 蛋白质 - FLAG - 蛋白质 | - | + | 未确定 | |
| C-末端 FLAG 融合蛋白： 蛋白 - FLAG | - | + | 弱 | |
| 钙依赖性结合 （复合物在含 EDTA 的缓冲液中解离） | + | - | - |
相关资源
- Brochure: Refine Protein Preparation
Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.
- User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.
- Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads
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