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Merck

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C7657

Colagenase

Type XI, 2-5 FALGPA units/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

Sinônimo(s):

Clostridiopeptidase A

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Sobre este item

Número CAS:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-582-9
MDL number:
Número CE:
Specific activity:
≥800 CDU/mg solid, 2-5 FALGPA units/mg solid
Biological source:
Clostridium histolyticum

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biological source

Clostridium histolyticum

Quality Level

form

powder

specific activity

≥800 CDU/mg solid, 2-5 FALGPA units/mg solid

mol wt

68-130 kDa

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

application(s)

diagnostic assay manufacturing

storage temp.

−20°C

Application

A clostridiopeptidase A foi usada em um estudo que descreveu um método quantitativo para avaliar pequenas quantidades de colágeno com base em espectrometria de massa (MS) por MALDI-TOF (dessorção/ionização a laser auxiliada por matriz por tempo de voo) após a digestão do colágeno.
Este produto foi usado no isolamento de linhagens celulares de adenocarcinoma ductal pancreático (ADP) e para cultura de tecidos de fibroblastos pancreáticos.[1]

Biochem/physiol Actions

A colagenase é ativada por quatro gramas de átomos de cálcio por mol de enzima. Ela é inibida por ácido etileno glicol-bis(beta-aminoetil éter)-N, N, N′,N′-tetracético, beta-mercaptoetanol, glutationa, ácido tioglicólico e 8-hidroxiquinolina.
A liberação eficaz de células do tecido requer a ação de enzimas colagenase e da protease neutra. A colagenase é ativada por quatro átomos-grama de cálcio (Ca2+) por mol de enzima. Acredita-se que o filtrado da cultura contenha pelo menos 7 proteases diferentes, que variam em peso molecular de 68-130 kDa. O pH ideal é 6,3-8,8. A enzima é usada tipicamente para digerir os componentes conjuntivos em amostras de tecido para liberar células individuais. O tratamento com colagenase pode provocar a morte de algumas células. Tipicamente, concentrações na faixa de 0,1 a 5 mg/ml são usadas para digestão. A duração da reação varia de 15 minutos a várias horas e para gerar uma eficácia satisfatória da dissociação celular que não cause morte celular excessiva. O tampão de Krebs-Ringer com cálcio e BSA é preferível e Zn2+ é necessário para atividade.

Preparation Note

A solução-estoque pode ser preparada dissolvendo-se 0,05-0,1 mg/ml de colagenase em tampão TES 50 mM com cloreto de cálcio (TESCA) 0,36 mM, pH 7,4, a 37 °C.

Analysis Note

Também contém atividades de clostripaína, protease neutra não específica e tripsina.

Other Notes

Uma unidade de digestão de colágeno (CDU) libera peptídeos de colágeno do tendão de Aquiles bovino que equivalem em cor de ninidrina a 1,0 μmol de leucina em 5 horas em pH 7,4 a 37 °C na presença de íons de cálcio. Uma unidade de hidrólise de FALGPA hidrolisa 1,0 μmol de furilacriloil-Leu-Gli-Pro-Ala por min a 25 °C. Uma unidade de protease neutra hidrolisa caseína para produzir cor equivalente a 1,0 μmol de tirosina por 5 h em pH 7,5 a 37 °C. Uma unidade de clostripaína hidrolisa 1,0 μmol de BAEE por min em pH 7,6 a 25 °C na presença de DTT.

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C9263C5138C1764
biological source

Clostridium histolyticum

biological source

-

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Clostridium histolyticum

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-

specific activity

≥800 CDU/mg solid, 2-5 FALGPA units/mg solid

specific activity

≥1 FALGPA units/mg solid, >125 CDU/mg solid

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

form

powder

form

powder

form

powder

form

lyophilized powder

application(s)

diagnostic assay manufacturing

application(s)

diagnostic assay manufacturing

application(s)

diagnostic assay manufacturing

application(s)

diagnostic assay manufacturing

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

mol wt

68-130 kDa

mol wt

113-114 kDa

mol wt

68-130 kDa

mol wt

68-125 kDa


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pictograms

Health hazardExclamation mark

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

Classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves



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Protocolos

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.


Eddie Rodríguez-Carballo et al.
Genes & development, 31(22), 2264-2281 (2017-12-24)
The mammalian
Olivier Nolan-Stevaux et al.
Genes & development, 23(1), 24-36 (2009-01-13)
Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is characterized by the deregulation of the hedgehog signaling pathway. The Sonic Hedgehog ligand (Shh), absent in the normal pancreas, is highly expressed in pancreatic tumors and is sufficient to induce neoplastic precursor lesions in mouse
Maria Molinos et al.
Spine, 43(5), E274-E284 (2017-07-06)
Human intervertebral disc (hIVD) cells were isolated from 41 surgically excised samples and assessed for their phenotypic alterations with age. Toward the design of novel anti-aging strategies to overcome degenerative disc disease (DDD), we investigated age-correlated phenotypic alterations that occur



Número de item de comércio global

SKUGTIN
C7657-1G04061833520925
C7657-5G04061833520956
C7657-500MG04061833520949
C7657-100MG04061833520918
C7657-25MG04061833520932

Questions

  1. How can I dissolve this product for Tissue digestion (Hanks Buffer or even medium possible)? Thanks

    1 answer
    1. This product is not tested specifically for use in cell culture, however, the product information provided for C9697 may be applied to this product. See the link below to review the product data-sheet. For tissue culture applications, collagenase can be solubilized in calcium-free solutions such as Hank's Balanced Salts (Cat. No. H 2387) or Earles Balanced Salt Solution (Cat. No. E6267).
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/390/021/c9697pis-ms.pdf

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