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Assays für Zellmigration und Invasion

Mikroskopische Aufnahme des Cell Comb Scratch Assay für Zellmigration

Krebsmetastasen sind das kumulative Ergebnis mehrerer Veränderungen in Tumorzellen und ihrer Mikroumgebung, die es den Zellen ermöglichen, in gesundes Gewebe einzuwandern oder einzudringen. Unser Portfolio an Migrationstests, Invasionstests, chemotaktischen und haptotaktischen Boyden-Kammer-Tests ermöglicht es Forschern, die Bedingungen zu simulieren, denen normale und metastatische Zellen in vivo begegnen.


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Zellwanderungstests

Die Zellwanderung ist von grundlegender Bedeutung für die Embryonalentwicklung, die Angiogenese, die Wundheilung, die Immunantwort und Entzündungen. Da die Metastasierung der wichtigste Faktor für die Sterblichkeitsrate bei Krebs ist, ist das Verständnis der Mechanismen der Zellmigration von entscheidender Bedeutung für die Krebsforschung. Viele Zellmigrationsassays verwenden einen qualitativen Scratch Assay oder die quantitativere Boyden chamber Technik.

Boyden-Kammer-Methoden überwachen die Zellmigration auf der Grundlage von Chemotaxis und Haptotaxis. Chemotaxis beschreibt die Zellmigration als Reaktion auf extrazelluläre chemische Signale, während Haptotaxis die Zellmigration in Richtung eines immobilisierten extrazellulären Matrix (ECM)-Proteingradienten beschreibt.

Beide QCM™-Migrationsassays, Chemotaxis und Haptotaxis, sind in verschiedenen Porengrößen und Multiwell-Formaten erhältlich. QCM™-Migrationsassays erfordern kein Markieren, Ausschaben, Waschen und Zählen der Zellen, wie es bei anderen Protokollen mit Calcein-AM-Markierung der Zellen erforderlich ist.

InnoCyte™-Zellmigrationsassays im Multiwell-Format sind für die Chemotaxis-Zellmigration vorgesehen. Dieser Assay misst die Migration von epithelialen, mesenchymalen und endothelialen Zelltypen durch eine 8 μm große Pore zu einer Feederschicht unter Verwendung eines zellpermeablen Fluoreszenzfarbstoffs.

Scratch Assay für Zellmigration

Ein Scratch Assay wird zur Untersuchung von Zellmigration und Wundheilung verwendet. Beim Scratch-Assay wird ein Kratzer auf der Oberfläche einer konfluenten Zellschicht erzeugt, um eine schmale wundenähnliche Lücke zu schaffen. Mit dem Assay wird dann die Migration benachbarter Zellen in die Lücke überwacht, bis die Lücke gefüllt ist. Unser Cell Comb™ Scratch Assay erzeugt ein hochdichtes Feld von Kratzern, um die Wundränder zu maximieren und gleichzeitig genügend unbeschädigte Zellen für die Migration in die Lücke übrig zu lassen.

Nahaufnahme einer Platte mit 96 Vertiefungen, wobei jede Vertiefung HT-1080-Zellen enthält und in der Mitte ein deutlich dunkleres, kreisförmiges Muster aufweist. Die Vertiefungen sind in zwei Dreierreihen angeordnet.
Nahaufnahme einer 96-Well-Platte mit HT-1080-Zellen in jeder Vertiefung. Die Vertiefungen sind in zwei Reihen zu je drei Zellen angeordnet.

Die Invasion von HT-1080-Zellen wird mit dem 96-Well Cell Invasion Assay bestimmt. NIH3T3-Zellen wurden als nicht-invasive Kontrolle verwendet.

Zellinvasionstests

Die Fähigkeit eines Tumors, die ECM-Komponenten der Basalmembran und des assoziierten Gewebes abzubauen, ist ein Indikator für das Metastasierungspotenzial. Unsere QCM™ Boyden-Kammer Zellinvasionstests sind ein empfindlicher Ansatz mit hohem Durchsatz zur Quantifizierung der Zellinvasion in vitro. In diesem Assay dringen Zellen in ein Modell der Basalmembran ein, bei dem die Membranporen durch eine Schicht von ECM-Proteinen verschlossen sind, die nicht-invasive Zellen blockieren.

Das Chemicon® neurite outgrowth assay verwendet die Millipore® mikroporöse Gewebekultur-Insert-Technologie, die den Durchgang von Neuritenprozessen durch 1 µm große Poren ermöglicht, einen Durchmesser, der Zellkörper nicht passieren lässt. Dieser Assay ist für PC12-Zellen optimiert.


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