Bacteriologia
A disciplina de bacteriologia se refere a todos os aspectos da genética, estrutura, fisiologia, comportamento, patogenicidade, ecologia e evolução de espécies bacterianas. Investigações bacteriológicas são essenciais no diagnóstico clínico e no controle de qualidade industrial. A aplicação da microscopia em bacteriologia envolve a coloração de microrganismos com métodos adequados (p. ex., coloração de gram) para determinar a classificação das bactérias ou detectar micobactérias.
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Coloração de Gram
A coloração de Gram é uma técnica de coloração essencial em bacteriologia usada para diferenciar bactérias Gram positivas e Gram negativas. Nesse método, a diferenciação é obtida pois as bactérias gram positivas retêm o corante cristal violeta devido à presença de uma camada espessa de peptidoglicano em suas paredes celulares.
Alternativamente, as bactérias gram negativas são descoloridas por solvente orgânico e adquirem a cor laranja-cor-de-rosa com a aplicação do corante de contraste, o que se atribui a uma parede de peptidoglicano mais fina. Os reagentes necessários para esse processo de coloração em várias etapas incluem cristal violeta (corante primário), corante anilina, solução de iodo (mordente) e os corantes de contraste laranja safranina (corante secundário) ou fucsina carbólica.
Coloração de micobactérias
O diagnóstico precoce da infecção micobacteriana é essencial, pois bactérias ácido resistentes são altamente patogênicas e responsáveis por doenças graves, como a tuberculose. Diversas soluções de coloração estão disponíveis para a detecção dessas bactérias patogênicas em culturas histológicas de tecido e esfregaços bacteriológicos. São utilizados métodos de detecção por fluorescência com a técnica de coloração de Ziehl-Neelsen, por meio de lâminas termotratadas (coloração a quente) ou tratamento sem aquecimento (coloração a frio). Essa técnica de coloração diferencial usa o composto fenólico solúvel em lipídios, a fucsina carbólica, como o corante primário e o corante de contraste verde de malaquita.
Coloração de Trichomonas
Parasitas Trichomonas vaginalis são particularmente comuns em material ginecológico, como esfregaços vaginais e sedimento urinário, e causam a doença sexualmente transmissível não viral mais comum, a tricomoníase. Vários corantes, como Giemsa e laranja de acridina, são usados juntamente com exame de lâmina úmida para o diagnóstico microscópico de Trichomonas vaginalis.
Aplicações da bacteriologia em outros setores
No setor de alimentos e bebidas, bactérias do ácido lático, como Lactobacillus, Lactococcus e Streptococcus, são usadas na fabricação de laticínios, como queijo e iogurte. Fermentações bacterianas são usadas no processamento de bebidas, como chá e café. No crescente campo de saúde da microbiota intestinal, diversas espécies bacterianas são usadas em suplementos probióticos para reduzir a inflamação e melhorar a função intestinal. Bactérias também são usadas no setor farmacêutico na produção e pesquisa de vacinas, incluindo tetraciclinas, eritromicina produzida por Streptomyces e bacitracina produzida por Bacillus.
| Corante | Aplicações |
|---|---|
| Laranja de acridina | Corante fluorescente com aplicações diversas; às vezes usado na coloração de Trichomonas |
| Fucsina carbólica | Cora micobactérias (AFB) |
| Cristal violeta | Cora bactérias Gram positivas (usado no método de Gram) |
| Fucsina básica | Cora micobactérias (AFB) |
| Giemsa | Coloração ampla; às vezes usada na coloração de Trichomonas |
| Verde de malaquita | Cora esporos e polissacarídeos bacterianos. Também corante de contraste para o procedimento de Ziehl-Neelsen |
| Azul de metileno (Loefflers) | Coloração bacteriana geral de gonococos, bactérias do ácido lático e corpúsculos em haste de pasturella |
| Rosa de bengala | Cora bactérias em amostras de solo |
| Safranina O | Cora bactérias Gram negativas (usada no método de Gram) |
| Corante de prata (Steiner-Steiner modificado) | Cora espiroquetas e bactérias não filamentosas, como espiroquetas em tecido embebido em parafina |
| Preto de sudão B | Cora material graxo em bactérias |
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