OGS545

PSF-TEFI-TPI1-FLUC-URA3 - WEKTOR DROŻDŻOWY LUCYFERAZY FIREFLY

plasmid vector for molecular cloning

• Synonim(y): szybki wektor
• NACRES: NA.85
• UNSPSC Code: 12352200
• Promoter: Promoter name: TEF1; Promoter activity: constitutive; Promoter type: yeast
• Origin of replication: 2Micron, pUC (500 copies)
• Bacteria selection: kanamycin
• Reporter gene: firefly luciferase
• Peptide cleavage: no cleavage

Właściwości

• form: buffered aqueous solution
• mol wt: size 9226 bp
• bacteria selection: kanamycin
• origin of replication: 2Micron, pUC (500 copies)
• peptide cleavage: no cleavage
• promoter: Promoter name: TEF1; Promoter activity: constitutive; Promoter type: yeast
• reporter gene: firefly luciferase
• shipped in: ambient
• storage temp.: −20°C
• yeast selection: uracil

Opis

General description

Podwójny transgeniczny plazmid ekspresyjny drożdży Saccharomyces cerevisiae, który umożliwia współekspresję lucyferazy wraz z interesującym genem. Wektor zawiera również gen, który jest niezbędny do syntezy uracylu, umożliwiając utrzymanie plazmidów w komórkach, które są wadliwe dla tego genu, gdy są hodowane w pożywce, w której brakuje uracylu.

Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor 1 czynnika elongacji translacji drożdży. Jest to najsilniejszy promotor, który zapewniamy do ekspresji w Saccharomyces cerevisiae. Zawiera również silny konstytutywny promotor genu izomerazy trisfosforanowej drożdży (TPI1), który napędza ekspresję genu reporterowego. Promotor TPI wykazuje podobny poziom ekspresji do promotora czynnika elongacji translacji 1 (TEF-1).

Application

Klonowanie genu: Plazmid ten został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie stosowanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny mogą być wstawiane przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.

Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: W MCS znajduje się kilka ważnych miejsc. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca downstream do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI.

Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania.

Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początki i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne położenie kodonów start i stop.

Analysis Note

Aby wyświetlić certyfikat analizy dla tego produktu, należy odwiedzić stronę www.oxgene.com .

Other Notes

Aby wyświetlić informacje o sekwencji dla tego produktu, odwiedź stronę produktu .

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable