アプロチニン

ウシ肺に由来する膵型トリプシンの阻害剤。膵臓トリプシン阻害剤（BPTI）として知られています。 膵臓トリプシン阻害剤およびトリプシン-カリクレイン阻害剤としても知られるアプロチニンは、肺、脾臓、肝臓、および膵臓での発現が認められています。また、仔ウシ血清中に遊離型で存在することも分かっています。[1][2]

アプロチニンは、分離/精製中のタンパク質と酵素の保護に使用されます。プロテアーゼ活性を阻害することで、細胞および組織の培養研究における細胞の寿命を延ばします。[3][4]

• さらなる用途：固定化アプロチニンによるウロキナーゼ、トリプシン、キモトリプシンの精製
• エステラーゼとプロテアーゼの混合物中でのカリクレイン活性の定量化
• 非特異的タンパク質分解を回避することによる臨床化学試験における制御された基質分解
• タンパク質の折りたたみに関する研究におけるモデルタンパク質としてのアプロチニン
• SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動での分子量マーカー

アプロチニンはセリンプロテアーゼを阻害します。カリジンやブラジキニンなどの血圧降下ペプチドを分解、遊離するプロテアーゼであるカリクレインを阻害します (ヒト血漿カリクレイン: K_i = 3 × 10^-8 M、pH 8.0、ブタ膵臓カリクレイン: K_i = 1 × 10^-9 M、pH 8.0)、トリプシン (K_i = 2.8 × 10^-11 M、pH 7.8, K_i = 2.6 × 10^-9 M、pH 4.0、非競争的)、トリプシノーゲン、キモトリプシン (K_i = 9 × 10^-9 M、pH 8.0)、細菌フィブリノリジン、プラスミン(K_i = 1 nM、pH 7.3)。
カテプシンG、アクロシン、ヒト白血球エラスターゼ、およびヒトウロキナーゼは弱く阻害されます。Xa因子、トロンビン、スブチリシン、パパイン、ペプシン、アンジオテンシン変換酵素（ACE）、カルボキシペプチダーゼAおよびB、その他のメタロプロテアーゼ、およびチオールプロテアーゼは阻害されません。

作業濃度：0.06～2 μg/mL (0.01～0.3 μM)
作業溶液：水（10 mg/mL）または緩衝水溶液（例えば、0.1 M Tris、pH 8.0）に可溶。
注：負に帯電した固相（例えば、クロマトグラフィーゲル、限外ろ過膜）へのアプロチニンの吸着を回避するには、NaCl濃度を0.1 M超とするか、分離中に使用するすべてのバッファーに他の適切な塩を添加する必要があります。
保管条件（作業溶液）：-15〜-25°C

水（10 mg/mL）または緩衝水溶液（例えば、Tris、0.1 M、pH 8.0）に溶解しやすいです。pH 7〜8に調整された溶液は、2〜8°Cで約1週間安定です。
-15〜-25°Cで保管されたアリコートは、約6か月間安定です。
注：凍結と解凍を繰り返したり、強アルカリ性溶液（pH > 12.8で不活性）に暴露しないでください。

3つのジスルフィド結合により高次構造が保持された58個のアミノ酸から構成される単量体ペプチド。

生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

阻害剤1単位（IU）は、pH 6で<10分間に1 Uのトリプシンを完全に阻害するアプロチニンの量として定義されます（トリプシン活性は、+25°C、pH 8.0、BAEEを基質として測定）。
阻害剤1単位ユニット（IU）（+25°C、BAEEを基質とする）は阻害剤約2.8ユニット（+25°C、Chromozym TRYを基質とする）に相当します。
阻害剤1単位（IU）（+25°C、BAEEを基質とする）は、カリクレイン阻害剤約26単位（KIU）（+25°C）に相当します。
阻害剤1単位（IU）（+25°C、BAEEを基質とする）は阻害剤約0.067単位（+25°C；Bz-D、L-Arg-4-Naを基質としたpH 7.8でのトリプシン測定）に相当します。
カリクレイン阻害剤1単位 = 0.17 μgの結晶アプロチニン。